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皮肤细胞的原代培养 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-4-15 10:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
有没有养过皮肤细胞的同学,想请教一下皮肤细胞的原代培养的消化方法~
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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2011-4-15 11:13 |只看该作者
虽然本人没有做过皮肤,但是做过心肌分离(collogenase, pancreatin), 大肠/胰/肺原代(collogenase, DNAseII), 小脑原代(trypsin),个人觉得其实原理都差不多,不过collogenase的效果比较trypsin温和一点。根据文献,皮肤应用胰酶。具体参考以下两篇文献:http://d.wanfangdata.com.cn/periodical_njtdyxyxb200404008.aspx9 l# c! [, s9 l# c( p
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZGYK201012017.htm
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藤椅
发表于 2011-4-16 22:55 |只看该作者
我做过大量的皮肤原代培养,其实原代消化的方法无外乎就那么几种,常用的是胶原酶,胰蛋白酶。个人认为,还是选择胰酶消化法
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板凳
发表于 2011-4-17 12:07 |只看该作者
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用胰酶消化30min,终止后培养。大概三天就能生长出来。3 e2 \7 O& `  q
如果胰酶的时间掌握不好的话,可以尝试组织块法培养,植块后5天左右能生长出,而且生长的比较好。
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