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楼主: sidalin301
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[请教] 做做免疫组化石蜡切片好还是冰冻切片好? [复制链接]

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11楼
发表于 2011-4-24 09:29 |只看该作者
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回复 gqs2872022 的帖子3 ?" q+ o  J8 T2 |6 F0 }4 l& s

- U2 Y0 v" {( s5 w: k; N0 e9 z再问一下,固定脱水后如果不急于做切片组织该怎么保存?

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12楼
发表于 2011-4-24 21:20 |只看该作者
直接液氮冻存就可以啦。但是根据我的经验,液氮也不能冻太长时间,尽快做。
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13楼
发表于 2011-4-25 16:15 |只看该作者
回复 zhangyan813 的帖子
7 i- D: }. \9 W( C9 x1 \/ R2 g9 R8 k, I- b) f) u8 u
谢谢了!

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优秀会员 金话筒

14楼
发表于 2011-4-26 14:43 |只看该作者
1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片,而那些稳定的抗原,能经受住石蜡切片的的考验,一般来讲也可以用冰冻切片来做,总得来讲,对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原,用石蜡切片检测的染色效果要比冰冻切片好一些。
1 t' S2 c6 q2 ^1 N; o% n2、从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确,而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构,并造成抗原的弥散,从而定位不准确。
* i$ x3 y0 f4 \) w5 F; o3 G3、从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好,而石蜡切片在组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。 9 R- _1 _- c9 H( A$ h, f
4、从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单,而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程,比较繁琐。 8 B# \2 z  `% {* c! ?$ ~6 u
5、总之,石蜡切片对标本的长期保存较合适,且组织细胞形态结构保持好;而冰冻切片适合对新鲜组织的制片,然后立即固定、染色效果较好,且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰。
! t- q8 t& p- y; o
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金话筒 优秀版主 小小研究员

15楼
发表于 2011-5-3 15:17 |只看该作者
免疫组化得话建议做石蜡切片,但是冰冻切片也可以。免疫荧光的话冰冻切片要比石蜡切片好
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16楼
发表于 2011-5-9 14:07 |只看该作者
谢谢

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17楼
发表于 2011-8-22 18:43 |只看该作者
回复 zhangyan813 的帖子$ B, {. C: e$ p  {* |

  F: _' t, i% i/ ?, Z# p( z请问你有那样的protocol吗  包括试剂公司什么的3 H3 _( y( m! V) s( Y  C6 V( o

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18楼
发表于 2011-10-21 10:03 |只看该作者
石蜡切片观察形态比较好,而冰冻切边主要是为了染色
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