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[请教] 关于microRNA的反转录试剂的选择 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-4-28 13:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在进行一些microRNA的筛选及验证实验,但是发现microRNA的反转录体系与一般的RT-PCR不同。曾经用过锐博公司的反转录,每种microRNA需要单独反转录,不仅工作量大,而且对样本量要求高。后面尝试使用TAKARA的通用反转录体系,特异性又太差。不知道各位有没有使用过其他更好的microRNA反转录系统?不胜感激
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沙发
发表于 2011-4-28 16:11 |只看该作者
回复 alioli 的帖子% g" A9 }, @& w. x

) d) ~% t* }4 w" P& ~* w你用Tapman microRNA reverse transcription kit 试试,我们都是用tapman 来做microRNA的。
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藤椅
发表于 2011-4-28 21:47 |只看该作者
我们用的是国产天根公司的反转录试剂,还好了。
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板凳
发表于 2011-4-28 21:58 |只看该作者
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QIAGEN的通用逆转录试剂盒我们也用过,结果很好。

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报纸
发表于 2011-4-29 17:54 |只看该作者
天根的就不错,其实就是在miRNA 3’末端加多聚A 尾Poly(A),再使用oligo(dT)-universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终生成miRNA对应的cDNA第一链,没啥特别的啦
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优秀会员 金话筒

地板
发表于 2011-5-1 07:34 |只看该作者
我们使用Takara的公司的试剂盒,效果也不错。其实现在技术上各大公司都差不多,关键是稳定性上。
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