脐带MSCs培养液问题

哇牛

各位培养过脐带间充质干细胞的前辈或者对这方面有兴趣的前辈能否讲述下你们培养间充质干细胞使用的哪种培养液，效果如何？晚辈想学习学习

冠忠

培养脐带MSC是十分容易，基本上用FBS和低糖的DMEM就行。

哇牛

刚开始我用的是DMEM/f12+FBS,但是老师说用a-MEM，DMEM/F12容易使细胞分化，不知道是什么成分会导致细胞分化？

zhangmingqi111

脐带间充质干细胞我觉得目前争议还是存在的，大多数文献都是UMSC来源于watons jelly，我做过几次就我个人来说这层胶我觉得很难分离的，它包括血管周组织和羊膜下组织，所以剥离起来我觉得很费事，而且不纯，应该会用血管内皮之类的组织。
5 ]' S4 S. ^: G& L# ~大部分参考资料说MSC可以贴壁生长和消化生长，我现在用胶原酶消化生长没有问题，但是贴壁生长时好时坏的，有的时候半个月都长不起来；我觉得从形态上讲贴壁的形态要好于消化生长的形态。+ Q4 U* H. B7 b+ @4 J, M
关于培养基我们用的是高糖加5或10%的FBS都可以长，另外我们消化的MSC，用5%的血清培养5代就会出现老化，还请高人指点
1 [6 p$ _( Z7 Q0 i总的来说只要次日贴壁细胞，细胞就增殖的很快，没有贴壁的很难再长了

冠忠

哇牛 发表于 2011-5-1 17:57 8 ?0 n* U! u# k+ Q; Y
刚开始我用的是DMEM/f12+FBS,但是老师说用a-MEM，DMEM/F12容易使细胞分化，不知道是什么成分会导致细胞分化 ...

9 S% q: D' g$ C2 E/ a! {DMEM/F12不是太合适，因为它是高糖，二来是里面太多”好的成份”，所以对脐带MSC不是太好。

冠忠

zhangmingqi111 发表于 2011-5-1 20:55
; {& Q2 d+ G  K, U脐带间充质干细胞我觉得目前争议还是存在的，大多数文献都是UMSC来源于watons jelly，我做过几次就我个人来 ...

9 f3 l6 B) t4 a: h! X! d' K- f' ^
血管内皮是Umbilical Cord Vein Endothelial Cells，基本上可以说不是MSC，做脐带MSC，只要将动脉去掉，剪碎，MSC就会在组织”爬”出来。
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6 T# p' u* l2 `0 g& }MSC是容易贴壁，而且培养容易。
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; d+ G/ y- f( d8 h+ h高糖DMEM是不行，因为细胞会分化，一定要低糖。
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9 q# W8 ?& K% d+ n2 N一般来说，用10%FBS+DMEM Low Glucose+P/S，就可以。
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fengxuechunyang

脐带MSC相对来说好培养，但是与骨髓MSC比较就差点。完全培养基是10%的FBS +低糖的DMEM，这个文献都有的。用高糖的容易分化。不同的处理方法，贴壁时间不同，植块法的贴壁时间平均是12-14天。影响细胞培养的因素很多，主要是FBS 和DMEM。当然培养箱等的问题也要稳定。

哇牛

那么各位前辈用过a-MEM培养液吗，细胞培养效果怎样？

冠忠

哇牛 发表于 2011-5-2 00:05 & B0 X  P/ A# ~- @0 _
那么各位前辈用过a-MEM培养液吗，细胞培养效果怎样？

! J& D9 a* z" X5 ka-DMEM培养都不错，尤其是用在牙齿MSC。我用过，不错。

哇牛

好的，谢谢！