原代脐带MSCs培养，胶原酶消化20cm能获得多少细胞？

1301918986

我想问问你们的消化液胶原酶是几型的，是和胰酶联合使用吗，比例是多少？

death0270

如果是单纯的去血管后切小块消化，那么消化时间要延长才行，一般是消化过夜吧。

yanmin

回复 aibi1983 的帖子$ f) o9 C2 j  F/ y; [/ f

9 F0 N! J" V$ z9 a. O8 M请问你们做组织块贴壁，我有几个问题想请教一下
# ~+ e% T" M( |! \$ L) M0 o1、贴壁的组织是剪得很碎吗？大概有多大？# J) Q0 P& W- v3 s: {
2、你们组织块贴壁的时候组织块一直贴在瓶底，不会飘起来吗？
, s$ e3 m1 y8 }2 q5 u3、组织剪碎后是不是先贴于瓶底，于37度放置一下，然后再加培养液？8 H* _) k; |4 Y- v! F
4、初次加培养基大概加多少，是将组织刚刚没过就好吗？以T-25的瓶子为例~0 F- T4 o2 ~; [" q/ v3 R
5、一般你们做组织块贴壁都是用多大的瓶子？
4 w/ X- |% `( ~3 x' E; a麻烦您帮我解决一下这些困惑，谢谢~~

金戈

ljj0558 发表于 2011-5-20 10:56
& W6 X  e% o# }+ W  E计数啊 ，就是5x106/ml 接种的

0 w3 G' i9 A# X* N
这个密度？？？太高了吧？？？？

ljj0558

回复 金戈 的帖子( Z$ _/ v0 H! J) m
& q* m- r5 ?- `' h) @
大部分都不是的  一点都不高

lyj-0017

回复 lyrsea 的帖子% c( O, y3 A2 a) u

3 ?5 a# Z, H1 B/ k( X- U! |* G能否分享学习一下你们的酶消化方法和离心清洗过程？谢谢

lyj-0017

回复 lyrsea 的帖子
0 Y$ z+ Y& Q- f; M* O- B8 t0 n6 f% P5 J1 h& v4 `  z+ V+ h/ t
能否分享学习一下你们的酶消化方案和离心清洗过程？谢谢

yanxm920

酶消化法对细胞损伤大，影响细胞的活力，建议用组织块法，有效提高细胞的活力！

漾轩

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$ P# ~& u+ B7 F, s- j
/ r5 }, j) j# I5 W1 b2 j# F1 o- R0.125%浓度T75 3ml,室温消化3分钟，然后培养瓶清洗两遍，收集细胞悬液，离心去上清即可

yangyaping

原代培养细胞长到30%-40%就可以传代了，所以本来就不是很多，如果要多的话，建议传代培养