为什么培养基一放到培养箱里一小时就变黄了

zxdlala

支原体污染培养基会不会变黄呢？
0 W# y' Q4 O! k5 H3 n* y但是也不应该啊，在瓶子就没事，一放入培养箱就变黄，也不知道是血清的问题还是培养基的问题。

zxdlala

zhangyan813 发表于 2011-5-13 10:52 * y; w* }; ~6 f" w' P/ I) E
有那么明显吗，从培养箱中一拿出来就变红？我用的一种无血清干细胞培养液就是黄色的，一开始以为哪里出了问 ...

# C* z/ K, R  C. `
所谓的经典细胞是哪一种细胞啊？$ o# e, ?3 H$ r5 ~

hygene

回复 zxdlala 的帖子. u' w/ k- {! R8 S: [. ?

( o; K2 R  `, {9 }. |4 C0 ]1 k# N不知道你的培养液中NaHCO3加的是多少？这个也很重要。

have-a-rest

很快变黄估计是CO2超过6-7%了，测一下。
. C; h  Q& T! {" `; L' a还有是否加了NaHCO3？

idealgas

缓冲体系的问题。用的是gibco的粉末吧，我记得里面是有碳酸氢钠的，可以添加一定量的hepes作为缓冲。这个量我不记得了，不配液好久了，用的都是成瓶子的Gibco培养基~~但是这成瓶的也没一小时箱子里就变黄了啊，倒是在室外操作时间长了会变得更红。另外如果怕是支原体污染，那就用hoechst 染色下，一下就看出来了。

xiangchou812

肯定是缓冲体系的问题。培养箱里CO2浓度为5%，所以放里面以后pH会低点，但不至于像你说的那样那么明显吧？

xiangchou812

; i7 O5 j- l* R3 U3 R) g) R
' p3 U, J! w+ E你可以等变黄后测一下pH，如果太低就不行了。( j* O1 T7 I9 @/ x; S8 T
我觉得你要是在空气中操作时间长的话可以考虑用一下添加HEPES作缓冲体系的培养液。缓冲能力要强很多。

宗介

应该是缓冲液的问题 换一个缓冲液试一下

林艳841014

请问一下：问题现在解决了吗？我现在也遇到同样的问题，我估计是CO2的浓度不准确了啊。而且变黄的培养基放在培养箱没事，如果有细胞就会一段时间后污染。

bllx58

一个小时就变了，确实不正常
1 ]* F( p) m9 I7 Z# K1 {% w0 A, Z; Z5 h; _  L8 D( ^3 P
建议认真检查你的培养箱，CO2指示栏数据会不会变化，是否准确等