怎样解决牛卵泡液污染问题

lvxiao

我用牛卵泡液诱导，从第四五天开始出现真菌污染，我把卵泡液加到培养液后用0.22的滤器过滤两遍，加双抗，还是解决不了污染问题，请教有什么办法能解决卵泡液污染问题！

xiangchou812

用点抗真菌的药物试试，比如两性霉素。) f: K, e9 }0 a
不过0.22vm过滤的话不应该再污染了吧？会不会是培养箱污染了？

aulenuyah

培养液单独试验了吗？？是不是培养液污染了。# r( K  Q( _4 C7 ]+ A" O- ~  U
污染好多情况，可以在培养箱中单独孵育牛卵泡液，看看是否污染，先确定一下到底是培养体系中哪个部分发生了污染再解决吧

SCNT

1、你采集牛卵泡必须无菌收集，最好离心收集上清再过滤
/ ^, F" n9 e5 W2、培养液配制也必须无菌制备，也要再次过滤
/ T1 Z- |9 z2 |$ S7 Y6 ?5 j( N3、所有使用培养液，最好包括基础液使用前经过无菌测试

BenHantun

我也收集过卵泡液，我先离心，然后用滤纸过滤，最后用0.22um的滤器过滤，然后在培养液中添加，培养一段时间后培养皿中会出现一些很长的丝状的东西，皿底有一层果冻状的物质，但不影响细胞生长，丝状物质也不像是真菌污染。

aulenuyah

回复 BenHantun 的帖子
$ ^& C7 F+ w) Q
' \, Z/ s$ s) R& v8 Q3 a果冻样的东西？？你的液体里有没有少量的肝素？？我怀疑是你在取卵泡液的时候，弄破了卵巢上的血管，导致出血，培养后发生血凝造成的，这个还是比较容易发生的

lvxiao

培养液确定是没有污染的，我也是经常会在第4，5天的时候皿底有一层果冻状的物质，可是随着时间延长就会出现真菌样的污染，越往后越严重。