关于病毒的浓缩

wangyimei

最近一直在包装病毒，但是一直滴度都很低，都有哪些方法来提高病毒的滴度

yangpan521

先将病毒也室温离心后，再把上清用0.22um的超滤管4度浓缩，感染时不妨加入polybream可能会好点，

nihaohao

病毒浓缩需要高速离心，且时间较长。可能一般的实验室没有相应的离心机

nihaohao

把细胞状态养到最佳，然后包装病毒，病毒滴度会高一些。

nihaohao

转染试剂和DNA的比例，收集病毒上清的时间对提高病毒滴度也很重要

sunny2829

细胞养好一点，相信病毒滴度会高很多。
) r9 u; s% a8 n% e若要浓缩，不妨用100KD的超滤管4℃，5000g，离心30min，这样可以将病毒浓缩10倍左右~~~! J* \6 N( L: C4 ]  \) z
不知道你实验室有没有这样的离心机，你可以试试~~~

wangyimei

哦，要是我用超高速离心的话，用BECKMAN离心机，一般浓缩病毒的离心转速是多少，还有离心的时间，看了好多文章所用的都不同，这个有没有什么标准

大笨鸟

病毒浓缩没有多麻烦的，买几个Milllpore 的100KD 超滤管，4度，5000rpm 10min 就可将病毒液浓缩至250ul左右，最后将病毒浓缩液感染细胞，按比例加入相应的聚凝胺就OK啦。同时，细胞状态一定不能差，转染试剂要选好，病毒包装时，质粒与组分的比例也要好好摸索到最佳才行的。如果能够做到这些，10的7次方滴度是很容易得到的。祝好

nihaohao

“大笨鸟”你好# j) R( S4 Y) s# d
我以前看资料，感觉病毒浓缩要求高速离心（至少几万转），且离心时间较长，有的写半个小时，有的写几个小时。
* Y5 O: K) u1 J6 C% e
3 s! ^! x. H/ ]7 Q  J1 K请问你用多少量的病毒上清浓缩成250ul？

zxmflying

最好用新复苏的包装细胞，当然要把包装病毒的细胞养好。9 `" ^) J4 c( i$ u, Y+ V: M
我们病毒高速离心是用10000g，4℃ 2h，这样病毒的滴度会高很多