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楼主: 临床干细胞
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[讨论] 我的一个思路,请问这样行不行   [复制链接]

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发表于 2011-6-1 11:49 |只看该作者
学习啦。不过,如果用绿色荧光蛋白或者是LacZ等标记,会不会更直观呢?
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发表于 2011-6-1 21:40 |只看该作者
本帖最后由 张也行 于 2011-6-1 21:40 编辑
# D8 Y( L# f, v- M# K# B. r3 V0 x( F- K; [8 K5 q
也可以对注入的干细胞提前导入荧光蛋白等标记,这样就可以通过切片分析是不是你的干细胞发挥作用了。
3 C, ?- F' Z# x  W: ~6 z. j* [! d# Z* l: V5 K
我有一点不太明白,把一只动物的细胞注入到另一只动物难道就没有免疫排斥吗?
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发表于 2011-6-2 11:23 |只看该作者
直接标记细胞比较好,因为如果是用XY来检测的话,做PCR检测结果不是很具有说服力。我觉得检测移植效果,要看移植进去的细胞是否达到目的地,还有就是是否具有活性。
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发表于 2011-6-2 18:31 |只看该作者
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似乎不错,用Y染色体上特殊DNA片段作为DNA探针做原位杂交应该可以确定移植干细胞的位置。
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发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
grape 发表于 2011-6-1 10:37 % W  s# q1 \+ G$ G: h* g( Y9 a
思路还可以。
, O8 N. k6 c2 k: B% W# Y但输注的干细胞和体内新生细胞如何区分?$ i% q. Z% [7 |  D3 q: W/ |
个人认为,性染色体改变不一定是受体自体产生的染 ...

+ L+ ?! v& r, W; }5 p* y新生的细胞如果有Y染色体的话,就可以证明是由打入的干细胞分化而来的啊,难道我这样想不对吗
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发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
懵懂干细胞 发表于 2011-6-1 10:18
9 j- ?- i4 M/ |  s- W& W) B这个思想很好,在很多文献中都有用这个方法的!- q; {, j  p( D; {( g
我给你一篇看看!就是外源的细胞来源动物与受体动物是异 ...

0 g$ p  Z+ X: k2 {3 U+ F+ p非常感谢,我这就看一下

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发表于 2011-6-2 20:00 |只看该作者
回复 bathpp2007 的帖子; I+ ?5 P2 t) `, L

/ T5 ^: U+ N1 V" i  h请问你标记过么?是怎么标记的,用什么标记的?请教了!
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发表于 2011-6-3 11:16 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子  D4 x0 f" K, V2 n' r
5 {$ F% b# S+ m/ }$ F' e7 [
标记细胞可以用绿色荧光蛋白(GFP),可以选择转基因动物来提取细胞,当然也可以取正常动物的细胞,培养后转染GFP,但是自己转染的话GFP效率不高,而且不能稳定表达,大概4周后荧光几乎就消失了,转染对细胞本身就是一种伤害。所以如果要示踪的话,我劝你还是选转基因动物吧,很方便的,当然你的想法也是不错的,但是后期检测起来可能会很麻烦,不是每个实验室都可以做到的。
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发表于 2011-6-6 09:36 |只看该作者
回复 bin 的帖子% z- y0 {/ |. M3 n$ ]4 {2 j
' r' S) W2 ^1 h0 p6 h! x2 C
谢谢你的回复,用转基因动物当然最好,只是我所研究的是猪的iPS细胞,前期由于转基因猪的获得的也比较困难,也没有得到别人的细胞,现在要做后期的研究,标记只能选择其他方法了,有没有些比较好的,标记可靠、持久的方法介绍呢
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发表于 2011-6-7 21:48 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子3 ^7 ]; W9 X+ q* `4 F8 k; R% {" f  R9 M/ H
1 o2 y* l4 t% @3 R4 ^3 G8 l
听说用慢病毒转染GFP,然后可以筛选出稳定表达的阳性细胞,但是我没有做过,你或许可以试一试。
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