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楼主: 临床干细胞
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[讨论] 我的一个思路,请问这样行不行   [复制链接]

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11楼
发表于 2011-6-1 11:49 |只看该作者
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学习啦。不过,如果用绿色荧光蛋白或者是LacZ等标记,会不会更直观呢?
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12楼
发表于 2011-6-1 21:40 |只看该作者
本帖最后由 张也行 于 2011-6-1 21:40 编辑 7 x2 k& z; _  g' o0 _) V/ u' ^. d! n

+ P2 M0 ~6 I0 w% B% }也可以对注入的干细胞提前导入荧光蛋白等标记,这样就可以通过切片分析是不是你的干细胞发挥作用了。
. M! \/ C! i" I' @
( D3 g' g$ E% X我有一点不太明白,把一只动物的细胞注入到另一只动物难道就没有免疫排斥吗?
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13楼
发表于 2011-6-2 11:23 |只看该作者
直接标记细胞比较好,因为如果是用XY来检测的话,做PCR检测结果不是很具有说服力。我觉得检测移植效果,要看移植进去的细胞是否达到目的地,还有就是是否具有活性。
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优秀版主 金话筒 优秀会员

14楼
发表于 2011-6-2 18:31 |只看该作者
似乎不错,用Y染色体上特殊DNA片段作为DNA探针做原位杂交应该可以确定移植干细胞的位置。
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15楼
发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
grape 发表于 2011-6-1 10:37 ; \: F" ^2 Y2 e3 W
思路还可以。
7 R3 r. _' E% `# q3 W& Q( }但输注的干细胞和体内新生细胞如何区分?5 C; ]  X& u) K# K
个人认为,性染色体改变不一定是受体自体产生的染 ...
2 z9 C! d/ D; j$ y7 ]3 x+ s
新生的细胞如果有Y染色体的话,就可以证明是由打入的干细胞分化而来的啊,难道我这样想不对吗
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16楼
发表于 2011-6-2 19:11 |只看该作者
懵懂干细胞 发表于 2011-6-1 10:18
. l7 J* J* p! Q- O) ~# f% ~5 y这个思想很好,在很多文献中都有用这个方法的!6 p9 K# [# \: q7 g6 X
我给你一篇看看!就是外源的细胞来源动物与受体动物是异 ...

9 x$ E2 K- X& G( \非常感谢,我这就看一下

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17楼
发表于 2011-6-2 20:00 |只看该作者
回复 bathpp2007 的帖子1 ]) _  \( M' ~6 }+ _' m$ N0 a
8 @. g2 d) [: a- O/ U
请问你标记过么?是怎么标记的,用什么标记的?请教了!
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18楼
发表于 2011-6-3 11:16 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子
$ D* T+ H7 i# c: A6 @
: ?+ k! G2 T; {4 K# O* ?2 R标记细胞可以用绿色荧光蛋白(GFP),可以选择转基因动物来提取细胞,当然也可以取正常动物的细胞,培养后转染GFP,但是自己转染的话GFP效率不高,而且不能稳定表达,大概4周后荧光几乎就消失了,转染对细胞本身就是一种伤害。所以如果要示踪的话,我劝你还是选转基因动物吧,很方便的,当然你的想法也是不错的,但是后期检测起来可能会很麻烦,不是每个实验室都可以做到的。
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19楼
发表于 2011-6-6 09:36 |只看该作者
回复 bin 的帖子
: C$ M+ K# }/ _' G' [
! p9 t! n2 J, u" f2 B9 ]$ b; f" `谢谢你的回复,用转基因动物当然最好,只是我所研究的是猪的iPS细胞,前期由于转基因猪的获得的也比较困难,也没有得到别人的细胞,现在要做后期的研究,标记只能选择其他方法了,有没有些比较好的,标记可靠、持久的方法介绍呢
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20楼
发表于 2011-6-7 21:48 |只看该作者
回复 st_oliver 的帖子% \+ N. t5 P) l7 |$ e1 j; B
+ c$ @# K. X' @3 P3 R- G* Q# f
听说用慢病毒转染GFP,然后可以筛选出稳定表达的阳性细胞,但是我没有做过,你或许可以试一试。
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