犬BMSCs细胞交流

lkzjyx

关注干细胞之家论坛很久了，也看了很多，大部分人都是做的鼠BMSCs，还有兔、猪，唯独没有人做犬的，所以想找有做犬BMSCs的来交流下，有以下几个问题：$ p$ W# {. B9 Q" c3 N. ]1 w
1、用的什么方法获取BMSCs？  我用的是股骨近端穿刺，全骨髓培养法，用P3代细胞成骨诱导
+ S2 B7 Y5 j( a+ w' h: Q# K7 }2、用的哪种培养基和血清？   因为经费不足我暂时用的Gibco的培养基，TBD的血清，效果还不错
0 L" @2 ^% z0 D' Z6 B3 ?3、用的哪种培养瓶？   我用的50ml的玻璃瓶，10分种左右贴壁，后来我看文献偶发现说要用塑料瓶，不知道对不对呀# _+ c& p- k; u
4、全骨髓培养法和密度梯度离心法哪个好？  我前面提到了我用的全骨髓培养法
, ]" d3 x: }' f2 P: M* U5、BMSCs的鉴定？  我准备做碱性磷酸酶染色和茜素红染色，大家还有什么好的方法没有
% c, `. @' ]$ k' O/ K6、其它大家想讨论的问题和经验（我暂时没有想到，以后补充，大家也可以提出来交流）

lkzjyx

怎么没人回应呀  莫非真没什么人在做犬骨髓间充质干细胞的吗

细胞海洋

== 也许大家没有看到 我帮你提升一下

ytumuyangren

我们一般做的都是兔子的，血清用的是进口的比较多，国产的一般用的是民海的（距离比较近，哈哈），效果还可以，培养液用的是DMEM高糖；骨髓培养我现在还在养呢，期待能够长满，全骨髓培养太烦人了，在显微镜下看到的是一片红，我只好在培养一段时间后，不停的将原来的培养液吸出以1:3的比例分配到其他的培养瓶中，培养瓶用的是75平方厘米的，看到有人说用密度梯度离心得到的细胞，培养的效果比较好，我也没试过，你可以在问问这方面的高人；至于细胞的鉴定我们只看细胞的形态，没有染过色，这个就不太清楚了。

ytumuyangren

我们一般做的都是兔子的，血清用的是进口的比较多，国产的一般用的是民海的（距离比较近，哈哈），效果还可以，培养液用的是DMEM高糖；骨髓培养我现在还在养呢，期待能够长满，全骨髓培养太烦人了，在显微镜下看到的是一片红，我只好在培养一段时间后，不停的将原来的培养液吸出以1:3的比例分配到其他的培养瓶中，培养瓶用的是75平方厘米的，看到有人说用密度梯度离心得到的细胞，培养的效果比较好，我也没试过，你可以在问问这方面的高人；至于细胞的鉴定我们只看细胞的形态，没有染过色，这个就不太清楚了。最后预祝你试验成功，呵呵！

lkzjyx

看来现在一般都是在做兔子和鼠的呀  做犬BMSCs的给点力呀  其实我们实验室的做MSCs的很多，但也只有我一个人在做犬的，孤单呀，让我很欣慰的是他们看了我养的犬BMSCs后很是羡慕，觉得形态比兔和老鼠的都要好看些

stefan

楼主， 我在做犬的MSC，有机会探讨一下啊！我现在正在做诱导分化，不知道楼主做到那个阶段了？

lkzjyx

我已经快诱导完了

stefan

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不知道楼主诱导的效果怎么样，我这段时间诱导的效果很差，能否请教楼主诱导的方法？

lily46555

最近要做犬的BMSCs的全血培养，学习了，谢谢