八一八，为什么养个MSC总是有这样那样的问题

tingwuyu

我用FBS之前都是提前一天从冷冻室里移到4度冷藏室内，用前半小时或1小时再拿出来

飞翔的十字架

回复 生物化学zy 的帖子5 C) d2 B7 x* M- s  [- ]
# A! w1 u! Z1 a5 V, P
夏天的话我一般直接放室温
$ z& D0 V/ c1 r6 a* V8 [# e, P冬天会放水浴，但也就15min差不多了5 s" u. O  d+ Z. z' i1 v
其实培养基不到37度不会对细胞有损伤，换完液放孵箱温度很快就上去了

福牛

想请教下楼主，对于骨髓间充质细胞的纯化有没有好的办法，目前我只是控制传代时消化的时间来纯化一下，剩下的就让培养基选择一下……，但感觉这些方法都不是很满意，不知道有没有更好的方法来纯化BMSC。

福牛

想请教下楼主，对于骨髓间充质细胞的纯化有没有好的办法，目前我只是控制传代时消化的时间来纯化一下，剩下的就让培养基选择一下……，但感觉这些方法都不是很满意，不知道有没有更好的方法来纯化BMSC。

飞翔的十字架

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7 u! l, a5 `0 i# P& b
: v8 d6 Q: i: z4 I3 I我的经验：
1 k+ W5 n# |$ d% V+ d24h：全量换液 去除悬浮细胞；6 j2 ?7 y- Y8 n0 g7 U
72h：加PBS稍微震荡再换液；6 h5 W$ Q( x7 s9 @
之后换液视细胞状况用PBS冲洗；
1 U/ i3 U- Q; S! I; h9 t消化时弃去难消化的细胞；' T& o5 c3 S  x5 z$ N
细胞状态好时P2就很纯了 一般P3都没问题（流式结果）
/ W  E$ F, H2 w( E5 I' c, c. G1 R( Y7 O1 f" t( B5 G
一家之言，ls可以试试，关键是找到一个自己最有把握的方法

nightvsday

新版主很活跃啊。。

倒腾细胞

话说好像给细胞换液的时候没见师兄预热，这岂不是大失误？

yiyi8909

“老鼠骨质的异常，包括骨质增生，骨质疏松以及软骨化”如何看出来？实验室自己养的老鼠，前一段做的很好，这一段贴壁率很低，一直找不到原因，换了n个人还是不行。另外关于MSC培养基的选择，楼主有什么建议吗？低糖？高糖？D-F12？