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楼主: 生物化学zy
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请高手帮我看看小鼠MSC,有问题求助   [复制链接]

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发表于 2011-6-9 17:27 |只看该作者
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判断胰酶消化的时间可以在显微镜下观察细胞状态就行了。消化下来的细胞是MSC.未消化下来的细胞是杂细胞.可以室温消化。
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发表于 2011-6-9 17:27 |只看该作者
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: @: ~  a; b/ K7 Q* K& p( S& D% B6 D  c4 ]/ W! f, `$ }
呵呵,说错了是48h全量换液,去除血细胞。

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发表于 2011-6-9 19:13 |只看该作者
全骨髓法培养的原代杂细胞就是很多,可以通过传代除去。第一次传代时细胞密度不要太大,1:1传代就好了。
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发表于 2011-6-9 21:49 |只看该作者
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6 R2 W  \" f* _6 C( Q3 T
8 _  X# m$ e) Q3 z* S/ X7 D太敬业了,谢谢.

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发表于 2011-6-9 21:50 |只看该作者
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3 O9 X% k% A- `2 U6 c# H- |) T% ~  {7 \4 S0 K3 g
传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化
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发表于 2011-6-9 21:50 |只看该作者
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* H7 I$ ?( p8 m+ D
) L/ {$ ?( A0 K传到第几代时,细胞会比较纯?基本没有杂细胞了?我想诱导分化用,第几代时进行诱导分化
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发表于 2011-6-10 08:35 |只看该作者
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" |2 s: W, u- M3 O( E! ]5 r0 P$ z9 E: e
呵呵,一般在二三代就比较纯了。至于第几代进行诱导分化这个我没做过,不是很清楚。
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发表于 2011-6-10 08:48 |只看该作者
应该是破骨细胞,那个贴壁比较牢,可以通过胰酶消化的方法去除,可以加胰酶后放置于培养箱内5min后即可基本将MSC消化下来,一般传至3代即可纯化。
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发表于 2011-6-10 18:47 |只看该作者
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1 g* X- f* @- y! y
7 e. }, E) ^! L* R4 x到第3代左右MSC基本上就比较纯了。做分化的话三四代就可以试着做,因为随着MSC的传代干性可能降低,细胞也会老化。
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发表于 2011-6-10 21:38 |只看该作者
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# x- a% y5 }: {4 Z
! m  c. X3 K6 L3 o* B( }1 b% c# [谢谢,了解了
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