求某个基因的过表达能促进mESC增殖的文章

7ubo

大家知道哪些关于某个基因能促进mESC增殖的文章吗？/ Q. ~4 L4 a' _. I& G
我的通过Doxycycline在mESC中诱导过表达的一个基因貌似有这个功能，想知道别人会做哪些实验？% h/ q1 q0 n& q! O. o. O2 X( [' I
欢迎并感谢提供文章题目或关键词，谢谢！

张也行

你要是想验证某个基因在ES细胞自我更新中的作用，那一般都是用gain/lose-of-function的方法吧。比如用siRNA KD，再KO这个基因，看看是否对ES细胞的自我更新能力有影响，然后可以再倒入这个基因，或者用探针抑制siRNA，看看能不能逆转这个作用。
  A( J" w: k  {% u# i8 m& h如果想发现新的自我更新相关的基因，经费充足的话，可以来一次genome-wide RNAi screen之类的。

可怜的孩子

端粒酶、c-myc都可以，很多文献的。别人做的要更有意义，PNAS上一篇Tet-on控制增殖基因在神经细胞中表达，从而得到了具有增殖能力“干细胞”。你要想检测的话，检测增殖能力就可以，使用Brdu。

7ubo

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0 R" e5 n# H; ~
% [& c6 {8 B, m, X! ~: x5 X. H& i谢谢

7ubo

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, S0 _" P- [( K! O, x/ y
6 s/ e, p$ o7 WWnt-mediated self-renewal of neural stem/progenitor cells
5 ^- A2 Q5 ?! f是这一篇吗？刚才我试着搜索了一下。& |( h4 _; p/ C* b- o# ~2 @2 S0 \
我想先用流式细胞仪做一下细胞周期，有意义吗？
3 m, M0 x; e' {& Q$ i( |BrdU参入实验后续也是用流式细胞仪吗？还是免疫荧光？
- J2 w5 U" t6 J我是在mESC里过表达的，其增殖能力已经很强了，
- O, ?& d- E- }, H. g5 `2 Q* o* k检测端粒酶和c-myc用WB还是RT-PCR呢？

可怜的孩子

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. t- ^* j4 m1 `: \7 N/ k  _  `4 j5 ^1 b2 u' Q
文章的具体题目我忘记了，但不是你这一篇，是今年刚发表的，我记得是在论坛上看到的。理论上讲，流式检测细胞数目多，较免疫荧光结果更加可靠，但从发文章角度来说，最好也加上荧光的照片，检测可以都做的，互相印证。检测外源基因是否表达，一是看示踪标记GFP等的表达情况，另外，PCR的方法也说得过去，但个人感觉不是很准确，有条件的话进一步做WB最好。

7ubo

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  v+ w0 ^, q4 `4 D: d. [好的，谢谢