求助EPCs培养方法

mike8710

我养的大鼠骨髓来源的EPCs后来变成了脂肪细胞的东东   请教专业人士解释一二    请问有谁有清晰的EPCs的照片参考一二啊  培养时包被用鼠尾胶原与纤维连接蛋白有区别吗？

细胞海洋

建议上图 单个图片不要大于1000kb

baichunyu

首先，你用的什么培养基？EGM-2？如果是商品化的话就不考虑培养基的问题了,如果不是就好好研究一下培养基成分；
" M1 ?; P8 S9 `( @) I5 V其次，包被物还是有影响的，根据文献报道的最多的是纤维连接蛋白，明胶用的也很多，建议可以试试；
& B; _* X. e4 Q  K再次，分离方法上不知你用的分离液是多大浓度？是否正确？有无文献支持？在分离过程中尽量避免离心对细胞的影响，减少离心次数，分离后4天不要换液，第一次换液采用半量换。5 }( J4 p; F3 U- A
总之，这是我的一点建议和经验吧，根据自己的实验在实践过程中改进！祝研顺利！

mike8710

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您说的包被用明胶   它跟鼠尾胶原有啥区别啊   是不是用纤维连接蛋白最好啊   我请教过有关老师  他们说是那分化成了脂肪细胞  都是第十天的时候  您有您养的细胞的照片可以给看看吗？  我用的培养基是不是完全的培养基  好似是EBM-2自己添加生长因子  我比对了一下 就是我里面加的VEGF浓度是1ng/ml  别人用的是10ng/ml   您觉得这个有很大影响吗  谢谢您的建议 7 j7 @: _6 `* d- B2 G! c) I

mike8710

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' Q7 _; i2 h% b. x9 z. D' y% w+ r另外想请教您一下 您鉴定EPCs用的是什么Marker啊？

baichunyu

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! _$ U- B) V5 W. X9 b9 g% Q0 i- k5 F6 [4 A& ]
CD133,KDR,CD34.这三个marker，加上吞噬实验和WPbody。

baichunyu

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' j- r; {. {$ z6 p! c  l: z不好意思，这么久回复你，大多文献都是用纤维粘连蛋白，也有用明胶和鼠尾的，建议你还是做一下对比试验才可确定。VEGF的浓度对于EPCs很关键，10ng/ml是必须的！希望对你有用。

mike8710

回复 baichunyu 的帖子9 w# u* C0 W1 D2 Q( @( m

0 T: r2 r* Q  h6 n+ I非常感谢您的建议 谢谢！