ips复苏的问题

细胞-77

我们实验室是把要复苏的细胞进行十倍稀释，然后离心，离心后用加含有Y27632的培养液重悬，不可以把细胞吹成单个，这样细胞不宜形成克隆，而且容易分化。

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' W  a; D/ E2 W/ C; E: @. c' V# O/ @0 _; _( F- E
y27632都是i在哪买，使用量是多少

前途似锦

是人的？怎么看着细胞那么不园乎？

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回复 前途似锦 的帖子7 Q& r: T, s* L/ M6 {
3 [' U$ i0 T8 P: r$ H& v) f
是人的，可能 状态不好吧

wolfgang

鼠的iPS单细胞是必须的。人的相反，必须保持团块状。

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Y27632使用量是多少 ？？？？

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回复 guoanson 的帖子
- E; |' ?' m% t. U8 v4 k- t+ s4 j+ S+ L, n
Y 要加多少 " h, [7 M7 o, r
还有其他的？% q" r, }2 W$ f, o: Q& t
多谢啊

song58

个人经验：1 d5 _0 C  _3 b2 |  _
100nM，传代前后各处理8小时

573639471

回复 song58 的帖子4 L7 Y; _7 |& M* S, j& A% U5 h3 O; R: i
! H) b" G$ C8 r! p  w$ K
Y27632 不是提高复苏存活率吗？是复苏后加入吧  咋是传代前后呢

song58

回复 573639471 的帖子8 b) j+ W- w7 W7 O$ _. \

' D5 A/ }2 q2 A8 C4 q恩，我现在很久没用过了，但是以前用的时候确实是在传代前后都处理，而且这个方法就是follow文献里的protocol。
& z! m4 e+ h' f6 S, D8 P0 ^
5 v$ F& n* J$ ?( }3 ]今天我特意搜了一下，应该可以作为参考
$ W# N' a6 y6 o' _$ q6 B$ r% P, ?An efficient and easy-to-use cryopreservation protocol for human ES and iPS cells.
* e) ~3 C/ Q3 e! {; h! j' G) o! J( B+ |* ?, g) S# V; u
Baharvand H, Salekdeh GH, Taei A, Mollamohammadi S.
0 r  N6 D- H4 O- [
: k, {" T0 R) KNat Protoc. 2010;5(3):588-94.
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