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楼主: 龙之吻	go [请教] 伯乐Bio-rad的半干转仪，做WB时不同分子量的转膜条件 [复制链接]

hxf_86

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11楼

发表于 2011-7-7 17:40 |只看该作者

我转75KD的蛋白，机器一样，条件是恒压21V，时间我摸索过，低于30min的话大蛋白转不过去的。30-50min就足够了
另，考染有很多条带不是很好么，说明你的蛋白都转过去了啊

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liuerfu

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12楼

发表于 2011-7-11 11:00 |只看该作者

我的是湿转法。恒流200mA，2h转72KD以下的。3h转72KD以上的。

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liuerfu

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13楼

发表于 2011-7-11 11:02 |只看该作者

有时连续转了5h还能出条带，并且膜没有转过。（睡过头了

）

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cavalieroar

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帅哥研究员

14楼

发表于 2011-7-11 12:29 |只看该作者

半干转的话，有几点可能会有帮助。1. 使用转膜液先放入冰箱降温。2.考虑到每次转膜的膜大小，膜数量和液体多少都不同，其实每次的条件很难说是一定的，关键在于根据你需要的蛋白大小改变转膜条件。23v 20-25min 可以转大部分的蛋白，恒流的话0.23A，20min的样子，其实膜总面积越大，恒流所需时间就越长。

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