纯化的双链cDNA要比单链的cDNA更容易做RT-PCR吧？

miRNA

如题，
. W2 V! k0 ?" v/ G0 y1 W# f# N* e因为要P一段大约5-6kb的cdna片段，我在想合成cDNA的第二条链，然后纯化，这样应该更好P一些吧?) l" k% @2 @: r/ M
求问大虾？

langziforever

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一般来讲是这样，但是第二条链的合成比较麻烦，所以，如果只为了做RT-PCR的话，用单链cDNA就可以，另外，如果你要P出5~6kb的cDNA就更困难了！因为普通PCR用普通的tag酶P这么长就已经不太容易了，更何况是RT-PCR，要知道RT过程中很难反转录那么长的片段，当然也取决于你RNA的完整性和质量，以及你用酶的效果！