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楼主: dilal
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为啥iPS培养液体黄的这么快?   [复制链接]

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21楼
发表于 2011-7-26 22:39 |只看该作者
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在400倍镜下如果如果看不到细菌,应该就没有污染。如果使用KSR培养iPS,再加上培养液中的NEAA,一天之后变黄,很正常。iPS耗能很快,不能超过一天换液,密度不要太大。小鼠的iPS建系时使用KSR比较好,在后期的培养中使用胎牛血清比较好,嵌合体效率高。有文献发表,可查阅。
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22楼
发表于 2011-8-1 23:51 |只看该作者
饲养层细胞也在消耗代谢产生出酸性代谢产物,会使培养液颜色变黄,仔细观察一下是不是饲养层细胞没有有效的抑制其分裂还在生长?
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23楼
发表于 2011-8-3 12:07 |只看该作者
1、feeder的密度,接种的细胞是多少?两者均不宜过密
4 j& r8 x/ \5 k$ H- Y2、KSR/DF12还是FBE/DMEM?前者本身就会发黄
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24楼
发表于 2011-8-4 09:39 |只看该作者
已经证实了是KSR培养基自身的特性,我抽了一点培养基到离心管中,放入孵箱孵育,第二天去看液体就变成黄色的了。不过iPS对于培养基的消耗的确比较大,不知道是什么原因。
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25楼
发表于 2011-9-1 16:09 |只看该作者
估计是支原体污染的,我以前遇到过,支原体污染你看不到培养基浑浊的,会从细胞的状态看出来的,你做一下PCR吧
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26楼
发表于 2011-9-2 16:33 |只看该作者
大家好我也养小鼠ips 每次上饲养层之后就污染 不知道什么原因了 求教啊
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27楼
发表于 2011-9-2 17:06 |只看该作者
回复 遗云射月 的帖子
. g  ]$ j  _1 h- ?$ K5 [
9 F! C3 D2 `5 M" f建议查饲养层,最常见的是动物源性的支原体污染。
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28楼
发表于 2011-11-11 23:17 |只看该作者
回复 xq1205 的帖子9 f+ j1 w3 G5 ^2 P6 l9 U
3 N* U* {: p2 y4 S* b
求您所说的这篇文献,可以吗,嘿嘿,可以告诉名字即可。多谢啦。

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29楼
发表于 2011-11-12 09:23 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20
7 X1 G: B3 {( v6 k回复 cicadacjk 的帖子
5 C, i% |- B# u1 P- n6 p) f
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3 `- @7 i) {% E: n( l8 x: J
有意思,值得关注

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30楼
发表于 2011-11-12 09:24 |只看该作者
dilal 发表于 2011-7-11 12:20
9 x9 U& J$ D) j7 _回复 cicadacjk 的帖子
2 Z9 [0 m& g: C, @% z4 [* \4 I/ M7 \3 R0 S  p
是的,我们配制的浓度是15%,按照广州生物医药与健康研究所提供的配方配制的,细胞 ...

2 [$ t6 `2 ]0 I1 ~值得关注
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