关于ES细胞的全能性问题

ice_taisy

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3 c& m4 r2 ~# _3 ?7 Z$ L9 I我的说法只是个人见解，逻辑推出来的，子一代小鼠是一个受精卵发育而来的，不可能是嵌合体。它身上所有细胞带的遗传信息都是一样的。那么它如果不是你所要的基因型的老鼠，它就绝对不可能生出你要的基因型的老鼠。除非自然变异，那也不可能刚好变成你想要的基因型啊。至于你老板说的多交配几代。我想你意识是不是把母本的嵌合体小鼠多交配几次。因为嵌合体老鼠可能生殖器官是嵌合的，有的生殖细胞是正常的而有的是和你的阳性克隆一样的，这样说来继续交配倒有获得目的小鼠的可能性，不过几率应该不高。

ice_taisy

我的回答都是逻辑推理。你也可以多问几个做过这个实验的人。我还看有文献介绍四倍体补偿技术，比直接把阳性克隆注射到正常囊胚更高效，可以越过嵌合体小鼠直接得到杂合体小鼠。缩短周期，提高成功率。附上文献，希望对你有所帮助。0 t% P5 P/ L: f

ice_taisy

文献就是在干细胞之家的另一篇帖子里下的。

wxl87

你做的基因打靶，这样的ES cell 会不会对嵌合体的生殖能力产生影响，你知道吗？ ( b( A' L5 H3 q' N/ D
而且就是嵌合体交配后也不一定能获得杂合的F1代。8 d. l$ b- R$ K( H
这跟嵌合有关，虽然你看着毛色嵌合比例很大，说明毛色嵌合了，但其他的组织器官等等还不一定嵌合，生殖系也不定嵌合，所以不一定能得到杂合F1啊
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renqing001

回复 wxl87 的帖子
1 n* b4 ~! w' ~2 r
# M, L: }. Z2 w" u4 L( I8 j恩，你说的很有道理，谢谢！我会继续尝试

youyou315

同意chliu的观点，嵌合体第一代没有杂合体，可能正好产生后代的生殖细胞为野生型的而不是打靶了的。因为注射的ES细胞和ICM融合后理论上是随机分化成不同组织以及生殖细胞。不知道楼主的嵌合比例有多高，一般有90%以上下一代得到germline transmission的几率还是很高的。如果这个比例还不能得到杂合子，那就可能需要考虑换用来打靶的ES细胞了，因为有些ES细胞进种系的效率就是很低。