细胞污染问题

hawkyiger

培养的是贴壁细胞，现在集中出现的问题是在培养瓶的瓶口内侧出现一些霉菌；这种霉菌的特点是不会沾染培养基，出现在靠近瓶口的地方。不知道哪位曾经碰到过这种情况，有什么解决方案。（培养箱连续消毒多次，瓶盖朝上放置，吸取培养基时尽量不触碰瓶口）

deron

这倒挺特别的。楼主可以用碘酒，内涂环抹于瓶口，然后过火烧干，看看效果

流浪的波斯猫

不知道你的瓶口有霉菌是自己得出的结论还是经过验证后得出的，如果已经达到肉眼可见的霉菌并且只是出现在瓶口而不污染培养基只能是楼主太强大了，还有怎么是集中出现的呢？难道做了很多瓶，还是很多批次而老是出现这种情况呢？0 u' B  h, b3 m. @4 w6 J$ g
如果真有这种情况，确实应该在拧紧瓶口之前过一下酒精灯的....

lemma710

在瓶口的话怎么可能不会污染培养基呢。。。吸培养基不碰到瓶口这个操作难度很大吧……
, N  W0 I% C2 i/ \6 _" _2 k如果真的是霉菌的话建议马上处理掉……

langziforever

我估计你的培养基马上也会出现霉菌的，只是现在可能还没看到，这种情况应该直接把瓶口拧紧扔掉，因为霉菌是实验室的大敌，孢子一不小心会飘到四处，很难去除干净的，所以，尽量不要在超净工作台上吹风了，一般会关掉风机，只用酒精灯作为无菌手段，像楼上说的那样，烧一下试试，操作一定要轻而小心，即使损失些细胞也好，但你还是不要抱太大希望。

蓝O海

如果真是霉菌，我的建议是立刻将培养瓶扔掉，如果细胞很珍贵，那就换一个瓶子，严格无菌操作，盖瓶盖之前瓶子，瓶盖均过一下酒精灯。这样还有的话，那只能是你的实验室大清理了。

james_0619

严格无菌操作很重要，盖瓶盖之前瓶子口，瓶盖过一下酒精灯,不能只走过场.

chliu

瓶口有了霉菌，很难保证细胞不被污染，建议把这批细胞扔掉，检测其他的细胞有没有污染，确定培养箱中不再有霉菌污染以后再继续培养细胞，霉菌很容易传播，一定保证去除干净了，再养细胞

oucflora

楼主对于你所谓的霉菌还需要确定一下，如果是肉眼可见的菌丝团，那你的细胞已经很危险了。你说没有沾染培养基，是肉眼观察到的吧？如果培养瓶中有肉眼可见的菌丝团，那么培养基中很有可能已经存在只有在显微镜下才能检查出的细小的菌丝。所以楼主应该在显微镜下仔细检查一下。0 ^2 `# h. v' h$ z1 J4 |' [
如果确定是霉菌污染了，最好时将细胞丢掉。如果细胞很珍贵，只能先用抗霉菌的抗生素处理后，不开风的条件下，转移一部分细胞到新的培养瓶中培养，另外，记得在培养瓶瓶盖的外面用封口膜封口。每次试验操作时用酒精仔细擦拭瓶盖外围。3 \  d! d9 o- P
不知道楼主是否用的二氧化碳培养箱，因为二氧化碳培养箱太潮湿，很容易滋生霉菌的，如果细胞用细胞培养瓶培养的话，建议用普通的生化培养箱。