有关流式。。。 - 实验室综合讨论区干细胞之家



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 15766\|回复: 7	go [请教] 有关流式。。。 [复制链接]

lsp_318

新手上路

Rank: 1

积分: 0
威望: 0
包包: 1

楼主

发表于 2011-7-12 18:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

想做流式测量细胞凋亡，不知道对于细胞浓度有什么要求？还有悬浮细胞和贴壁细胞做流式有没有多大影响啊？谢谢。。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

Rank: 2

积分: 64
威望: 64
包包: 610

沙发

发表于 2011-7-12 18:27 |只看该作者

对浓度应该没啥要求，你可根据自己手头细胞的情况，选择分析多少细胞。至于悬浮和贴壁细胞，对流式分析来说也没啥影响，最后都要以细胞悬液的形式上样分析。只是处理的时候，贴壁细胞不要用胰酶消化，要用cell scraper。祝你好运！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 10	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

lsp_318

新手上路

Rank: 1

积分: 0
威望: 0
包包: 1

藤椅

发表于 2011-7-12 19:48 |只看该作者

哦，好的，多谢啊2 y, S( F4 N: W' l/ Y
不过听说流式细胞丢失量挺多的，不知道细胞少了的话对结果有没有影响？

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

aminhair

中级会员

Rank: 3 Rank: 3

积分: 657
威望: 657
包包: 282

金话筒优秀会员

板凳

发表于 2011-7-12 20:42 |只看该作者

浓度要在10（5）~10（6）以上。悬浮细胞和贴壁细胞做核染色时没有太大的区别，但是染表面抗原就有些影响了。control组一定要做好！祝你实验顺利！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

chliu

注册会员

Rank: 2

积分: 170
威望: 170
包包: 5

报纸

发表于 2011-7-14 01:13 |只看该作者

每一个样品大概100000-1000000个细胞，抗体用之前最好做一下浓度滴定，每批抗体有时也会有差别。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

amosummer

版主

Rank: 7 Rank: 7 Rank: 7

积分: 1403
威望: 1403
包包: 5968

金话筒优秀版主帅哥研究员积极份子优秀会员小小研究员

地板

发表于 2011-7-14 11:25 |只看该作者

浓度应该没有太大要求，只要不走极端就可以10的5次方到7次方都可以吧。细胞的形态也没有什么影响，只要是单细胞都可以的啊！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

lsp_318

新手上路

Rank: 1

积分: 0
威望: 0
包包: 1

7楼

发表于 2011-7-15 19:13 |只看该作者

谢谢高手的指教啊。。

回复引用

举报返回顶部

RIVA2011

新手上路

Rank: 1

积分: 0
威望: 0
包包: 20

8楼

发表于 2011-9-6 14:07 |只看该作者

你要检测的细胞数要和你的抗体成比例，太多或太少都会影响检测结果。至于贴壁和悬浮细胞的检测，没啥可比性。但是你在做贴壁细胞的凋亡在消化处理时，要多加注意，注意人为因素造成的凋亡，处理过程要轻柔，对于比较敏感的细胞，最好在4度冰浴上进行。检测时别忘记设空白、补偿管~~

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 10	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

‹ 上一主题|下一主题 ›

返回列表

关闭 安全验证

[请教] 有关流式。。。 [复制链接]

关闭安全验证