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本帖最后由 grape 于 2011-7-26 14:17 编辑
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一抗二抗生物学定义
6 m ^0 @* X0 K- I+ q; R7 M一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说，抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答，由B细胞产生的可以与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。8 r5 @7 u# S0 d
二抗是用利抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体.
2 V9 D5 f; t5 \: p区别
* p7 z2 M. F0 V {2 U4 u1 Y第一抗体' j9 d( y# ^2 P, C' a9 f8 ^
第一抗体就是能和非抗体性抗原特异性结合的蛋白。种类含有单克隆抗体和多克隆抗体。/ i% k0 }" Q% l& `
第二抗体 `% F* X8 v% O3 ^# _5 C
第二抗体是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。
2 j* ]$ ?* D4 k- ~9 \1 [/ G/ g举例
+ [5 t! F& l- v, o 利用抗原-抗体反应原理，就是以一抗作为探针，它与目的蛋白作用并连接，再用带有荧光（或同位素）标记的二抗与一抗作用，最后显色，发光位置就有目的蛋白。
- B5 ^' P5 Q6 ?6 B2 _要点
0 R& A7 g9 b" \7 F) e4 f n 一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。, J; l2 y+ V, C9 ]! a- L3 u& v U
% K' F5 `3 w% g. H+ ~4 G
至于如何选取适合的一抗、二抗，要根据你具体的实验目的来确定。
9 ?) C0 M! O# _8 g) Y一般来讲，二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。
+ p E5 _9 ^. {# W除了要与一抗的种属来源相一致，二抗还需与一抗的类别或亚类相匹配，这通常是针对单克隆抗体而言。一般来说多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。而单克隆抗体则相对复杂些，由于单克隆抗体有不同的类别和亚型，因此相应的二抗也需要根据这些亚型进行选择。单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果您的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者您也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果您的一抗是小鼠IgG1，那么您可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。由于在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，因此除了需要考虑一抗的种属及类型外，还需要根据后继的检测方案选择不同标记的二抗，因此需要对二抗的标记物进行选择。* X9 q: Q: C7 K; g: H& r. C- J
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发表于 2011-7-26 13:33
