关于原代SKP细胞球形成的时间问题

bin

       各位同行，小弟最近培养皮肤来源的前体细胞（SKP），接种已经4-5天了，根据文献报道此时应该有细胞球出现，但是我的细胞好像没有看到细胞球。我是按照Nature Protocol上面的步骤来的，为什么呢？

bllx58

回复 bin 的帖子1 u9 V( |3 V: G2 @* D( v7 E! n: d

6 L) A5 J# |% m7 J) Y) a+ m8 A6 a写详细点操作吧
( E  D8 c5 z* N/ d- D+ K是悬浮的吗，培养基成分对吗

bin

回复 bllx58 的帖子6 d5 G- c% j" I) e/ x

, ~6 A* e; `! d2 l8 v7 k( d# WSKP是悬浮生长的细胞。培养基用的是DMEM/F12(3:1)，不加血清，加40ng/ml的bFGF，20ng/ml的EGF，2%的B27，DMEM是成品，F12是我自己用粉末配的。步骤基本上就是按照Protocol上面的步骤来的，不同的就是消化时间，得到的原代细胞存活率很高。