兔骨髓间充质干细胞首次消化比再次消化明显容易

suifengerqus

兔的MSC原代首次消化时，消化效果很好，20秒就得终止，否则细胞损伤很大，但每次从第一代开始消化后，消化时间明显延长，缩短时间则细胞反复吹打后很难脱壁，若超过40秒，细胞损伤很大。每次消化前PBS洗涤细胞1-2次，温度都控制在26-30度，Gibico的0.25%胰蛋白酶,含EDTA0.02%
& }3 k6 T: q& x% B6 z。为什么首次消化与再次消化差距那么大呢。很头痛，如何解决该问题，请各位前辈指导啊  $ P" c$ |# k. |4 v; H2 {

deron

细胞形态变了没？" G7 H/ s5 H2 L4 {1 G$ b
有没有可能是你的第一次消化离心，因为密度或者消化程度的问题，而导致细胞的损伤呢？

jn808

传代后换新的培养瓶了吗，如果继续使用原来的培养瓶对细胞状态有一定的影响！

liuerfu

请问具体有啥影响
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