求教：有没有转染原代小鼠胚胎成纤维细胞效率比较高的脂质体？

yuyan

请教各位：
( l3 C8 \* |% l9 b# a我们自己取的原代小鼠胚胎成纤维细胞，想用脂质体做瞬转。但是一直没找到合适的试剂。
1 A+ o) u( S" _" }- `; y现在已经试验了两种：英俊公司的lipo2000和罗氏公司的X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent ，转染的GFP质粒。3T3细胞还可以，效率基本在20%-30%。但是MEF细胞几乎没有荧光表达。请问各位有没有适合原代小鼠胚胎成纤维细胞的脂质体？
8 ?  t8 l: C: i+ i谢谢！

gact

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* L0 Q$ c+ w: `( l& o8 T* w& j# `3 r& C% S& ]/ K: f+ q) G
不用病毒么？
( X  J1 c& \- b或者电转+ l) @+ e$ M- x

张也行

lipo2000和Fugene应该都可以啊，看看你的转染方法是不是正确，还要摸清楚质粒和脂质体的比例以提高效率。怀疑不是你们的质粒有问题，就是你们的脂质体买假了。

yuyan

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2 L4 x3 @4 O' a  E6 ^& P7 U  U2 C
本打算先瞬转看下结果，后面是要做病毒的。
. f  J& Y* V# v7 F, }电转成本太高了呀，呵呵~~

yuyan

回复 gact 的帖子! t; }) g4 f  c$ `( K

3 ]8 o8 m% c- D6 i% z: w脂质体转细胞系是没有问题的，就是原代细胞的效率太低了。. g% a6 E+ F2 L3 ^4 V7 }
我们再调整一下比率试试吧。
8 b* P# p# U' g" F% ^谢谢啦~~