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[讨论] 除了EB还可以用什么对DNA染色效果好 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-8-29 16:20 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
平时做PCR完了之后跑电泳,都会在胶里放上EB。染色效果很好,但是总觉得EB是强致癌物质,对健康有害。请问还有什么染料染色效果好,价格便宜,并且对人体危害要小的吗?
# B5 A+ b8 Y  L! }2 w/ n6 d
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沙发
发表于 2011-8-29 19:13 |只看该作者
不同核酸染料染色性能比较
" m& g$ G3 E- K) B& Q+ x1 j名称                 灵敏度   稳定性    适用性                              安全性                    价格  
$ A$ P, L$ g# U* m  t& n' gSybr green I         高       较差   100bp以上片段,荧光定量    低毒                         高
2 z2 Y8 l1 S4 O8 w$ cSybr Green II        高       较差   单链核酸分子                        低毒                        高 " l( q- W- X* i
Gold View I         较高      一般    500bp以上双链核酸            高毒性                      低
0 A0 \6 [$ q# Y3 bEB                        高       极高   100bp以上电泳染色             强致癌                     低
, A* o" o; h$ o3 H# nRedGel               极高      极高   通用大小片段电泳染色   美国环保局安全认定     中
2 ?" ?- N, F# K1 x% h# L1 x  s这是RedGel产品宣传上的,我们之前都用EB
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藤椅
发表于 2011-8-29 21:21 |只看该作者
事情总是对立统一的,要么低毒价格高,要么高毒价格低,总是矛盾的。9 z; j! D4 b7 C# L9 \3 R& H
SYBR Green I是一个不错的选择,经费允许的话。呵呵
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板凳
发表于 2011-8-29 21:49 |只看该作者
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回复 lyricys 的帖子7 l% B, q6 X* ?' p

9 |0 d7 Z* c% {目前在国内估计EB还是无法完全取代的,即使在国外也基本都在使用EB,替代染料不光价格高,其实染色效果有些也并不理想,所以,只能操作时注意点了,我在实验室养成的习惯就是勤洗手!结果现在觉得自己有些强迫症了,总想去洗手!不过至于EB的毒性,我接触很多国外回来的老板,经常都是不戴手套接触的,有些人认为EB无法穿过细胞膜,更别说嵌入DNA了,但这种说法并没有查过相关文献证实。只是见过western blot的发明者做演示实验真的是拿手直接去捞EB染色的胶,当时觉得牛X的人,但我们还是宁愿信其有吧,总之,只要多注意就好了!不害自己也别害他人!
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报纸
发表于 2011-8-29 23:01 |只看该作者
AO嘛
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地板
发表于 2011-8-29 23:46 |只看该作者
可以找宝泰克公司有一款说是可以替代EB进行凝胶电泳显色的,和EB一样的用法,可以尝试一下
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发表于 2011-8-30 08:44 |只看该作者
一般都是用EB的,因为效果好,但是要是怕污染或着真的不能用,就用Sybr Green 吧。但是效果是不可替代EB的。用了后你就知道了。要不大家也不会冒着危险区用EB啊。
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发表于 2011-8-30 13:33 |只看该作者
回复 yuhaoze 的帖子
5 P, A. E+ l4 Z9 c5 L3 Z
9 O% a- E5 C3 h6 i3 q$ L2 h还请大牛告之AO的全称是?

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发表于 2011-8-30 14:41 |只看该作者
我们用的一直是RedGel 效果不错 至于毒性都不小吧 能和DNA嵌合哪怕只是暂时的也是让人不放心的 所以通风橱加多换手套才是最保险的
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发表于 2011-9-1 09:29 |只看该作者
我们实验室还是在用EB,老板教育我们不用带手套,可TNND他自己比我们还小心,全TMD扯蛋。出了成果是他的,要命是我们自己的。隔壁实验室用得是RedGel ,效果还是不错的,和EB比起来似乎不比EB差。
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