请教关于神经干细胞换液的问题

kzhaoren1984

请教各位高手了，我刚刚开始培养小鼠的神经干细胞，原代培养24小时进行换液，由于细胞和细胞碎片、死细胞都成悬浮生长，请教各位高手我该如何进行换液才能最大限度的清楚掉细胞碎片及死细胞，保留活细胞进行培养，再有一个问题是一般情况下首次换液是在培养后24小时还是48小时，而后一般间隔多少小时换液一次？谢谢各位高手了

愤怒的小鸟

能给我讲讲你怎么做的原代吗

kzhaoren1984

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5 H; `/ J# g% [+ S% C! y
我做的是出生2周的昆明鼠，猝死后断头取脑，尽可能多的剥离脑膜和血管，采用机械分离和酶消化相结合的方法提取单细胞，过400目的细胞筛，提取单细胞悬液，温箱内培养。

jj2570782

首次换液最好在48小时，细胞状态稍稳定后。* @: ?' `( m+ E$ ~( A
减少离心时间和速度可以减少细胞碎片。

kzhaoren1984

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3 z5 U# L9 R9 K谢谢了

shuishanglingzi

回复 jj2570782 的帖子0 |$ n6 E" A, l' w# r
: g- f. t6 m( @2 o1 k' A/ L
请问您离心的时候一般用多少g，离心几分钟？

leozarah

1000rpm.1min，我们实验室一般采用这个。