有人养小鼠骨髓间充质干细胞并传过很多代的吗？

dragon513

回复 asejon 的帖子: l4 i6 g4 w9 ~: h3 \0 q

$ S4 S; m8 g2 T$ g15分钟去除巨噬细胞、上皮细胞等是在一本教科书上看到肌肉源间充干细胞这样可以的，上面讲这些细胞会贴得很快，MSCs要慢一些。我也想着基本原理都一样就借用过来了，没有验证过，但应该不会是分离成败的关键问题。书好象就叫组织工程学吧，记得不太清楚了，我以前以前也做肌肉源MSC。

dragon513

回复 jyf200383 的帖子
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15分钟去除巨噬细胞、上皮细胞等是在一本教科书上看到肌肉源间充干细胞这样可以的，上面讲这些细胞会贴得很快，MSCs要慢一些。我也想着基本原理都一样就借用过来了，没有验证过，但应该不会是分离成败的关键问题。书好象就叫组织工程学吧，记得不太清楚了，我以前以前也做肌肉源MSC。

dragon513

回复 李1二 的帖子
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3 f4 {) s0 L6 |5 h5 j呵呵，我还是没做出来，情况跟你的一样，一传代就完了。郁闷了好久，后来换成大鼠，方法基本差不，就没什么问题了。

dragon513

回复 violet_sc 的帖子
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第4个问题：我看到资料percoll或ficoll分离液分的也是单核细胞并不能真正意义上提高细胞纯度，无论梯度离心还是差速贴壁都可以，这应该不是实验成败的关键。

dragon513

非常感谢大家关注！我当时实验很苦闷，没想到一石激起千层浪，而且还真能找到不少同样情况的兄弟姐妹们。某知名干细胞公司也遇到过类似情况，只是他们分出来了，他们说原代长得太慢，一直等到它长满，传两代就不用那么小心了。尽管我换成其它种属了，只要我还做干细胞相关研究，我就会继续关注的，太多的偶然就是必然。很抱歉有一阵没有上干细胞之家了，也没有及时回复。希望我提供的信息对大家有用，大家也多晒晒方法，有心人可以做做分析和比较，要是有人能专门做点工作那是最好了。

老姜

小鼠骨髓间充质细胞的培养一则与鼠龄有关，更重要的是要用小鼠骨髓间充质细胞培养专用培养液，细胞立即长的好，别的间充质都能养出来，不是技术问题。我们最初与楼上的同僚得到一样的结果，现在养小鼠骨髓间充质细胞一点没问题。

沁蓝之城

我用的是70um的滤网，文献上也是这么说的啊3 t$ D, v7 v% g  b2 k9 k

franklinhg

种属体积越大，MSC越好养。 小鼠的MSC主要是要小鼠年龄比较重要。C57和Balb/C的分离出来都不一样。

azzyou

回复 sysuhoo 的帖子
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同意你的观点，原代主要是混杂了很多杂细胞，MSC长得比较慢，等到传代到4，5代左右，杂细胞基本去除，就能像正常细胞系一样传了。

dragon513

回复 老姜 的帖子$ o/ M4 x; \0 d7 c0 e3 q
  o: F( Z" w! n" Y# ~3 w* H/ A
谢谢！请问老姜：你们所用的“小鼠骨髓间充质细胞培养专用培养液”是什么培养液？哪个公司生产的哪类培养液（低粮、高糖或DMEM/F121:1），加了些什么？能做些详细的说明吗？不胜感激！