MSC 冻存问题

湖南干细胞

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谢谢。

漂流萍

回复 tkpss18 的帖子+ H7 m+ U# v6 D  J5 ?0 h9 h

; K) k& d' }$ \* r请问，为什么复苏的时候样本不能完全解冻呢？

na6021023

回复 hwlightning 的帖子* r6 q& h4 |" t3 D% n: T
+ V2 ]- C2 d& I
原来大家都是42度水浴。我们实验室一直用37度水浴，而且怕污染还给冻存管外套一个PE手套的指头。每次都眼看着2分钟过去了，还是有冰晶。学习了。

deshenglll

70%比较低了，再加上不贴壁的细胞，那就更少了。看看是不是操作的问题。我们一般39度水浴复苏两分钟，用4度生理盐水洗去DMSO，洗两次。
* H2 O* l/ d$ }. F冻存前细胞不要长的太过。90-95%都还行吧。冻存密度：106-2*107/管。祝你好运。

lazyworm

5%DMSO就行了，用配制好的培养基配制冻存液，只用FBS还是有点浪费哈。复苏时水浴锅温度40度比37度要好。