我传代后的细胞贴壁6小时后 我对其进行了换液 但是后面细胞就飘起来了

zhaonicholas

如题，请问这是怎么回事啊？我传完代后过了6小时去观察细胞 细胞贴壁很好，于是我就为了让细胞生长得更好一些就对细胞进行了换液 但是换液1天后我去观察发现细胞大部分都漂浮起来了，但是我也没发现培养液有什么异样不像是污染，请教大家看是否是我6小时的时候换液造成的？

zhangyan813

如果没有明显的其他原因，应该就是换液造成的，因为换液的时候如果力度掌握不好，可能将刚刚贴壁的细胞有吹起来了。不知道楼主培养的是什么细胞，我之前做STO滋养层细胞6个小时换液是没问题的，但是贴壁不是很紧的细胞，肯定会有影响。

menghy

楼主是第一次培养这个细胞嘛？还是原代培养后传代细胞？一般细胞贴壁是在4小时之后，6小时应该是贴好了，但是这个时候细胞在贴壁的力度还是差些，操作不小心的话很容量让细胞再飘起来。楼主这个细胞要求一定6小时换液嘛，可不可以延长到12小时以上再换液就应该不会再出现这个问题了。

zhaonicholas

回复 zhangyan813 的帖子3 }+ U; x/ ]; i; Y# a: T) x/ n
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哦 那这样的话细胞是不是已经死了啊？

zhaonicholas

回复 menghy 的帖子
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( J3 i( n* }9 o6 O8 T6 X, o不是第一次养 以前是过了夜再换得 那这个细胞还有救没有呢？

zhusealin

常规细胞培养，换液太频反而不利于细胞生长，培养基颜色没有变化就不需要换液。楼主如果有细胞还是贴壁的，可以再养养，也许可以长起来

juan880929

首先换液太频繁了对细胞不好，因为细胞自己会分泌一些生长因子来维持自身的生长，换完液后细胞总归会适应一段时间。如果细胞类型是生长旺盛的细胞，可以在传代或复苏的时候多加一些培养液，建议24h以后换液比较好。8 S, H7 m7 l7 G. Y
但是以个人的经验，6h换液不会对细胞造成如此大的影响，建议楼主从其他方面找一下原因。不是只有细菌污染一个因素会使细胞大量死亡的，你可以新配一些培养液试试，或者检测一下细胞是否有支原体污染。

新疆八钢

回复 zhaonicholas 的帖子4 o6 f& T! a% S) j
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如果没有特殊的实验要求，一般在培养液老化后再换液，时间根据细胞生长情况和你的培养液的量，24~48小时，这期间换液不会影响细胞生长。6小时换液，这个时候细胞在贴壁的力度还是差些，操作容易让细胞再飘起来。过于缩短时间换液对细胞生长影响不大，只要在培养液变色前换液细胞就能很好生长，可以在细胞培养24小时后换液。

menghy

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, G% ~; s4 `! M+ [# N( e: L4 L3 e可以培养几天看，应该还是有一部分的细胞是贴壁的了。张几天后如果细胞还是生长很慢可以将细胞消化下来转移到更小体积的培养板内培养，待细胞长成单层后再扩大培养，也许还有救。

轨道列车

培养液有没有更换批号，更换也会有影响。消化时间过头也会有影响。