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hMSC成骨诱导分化茜素红染色   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-9-29 14:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我做的MSC成骨分化的茜素红染色,这样算是阳性结果吧?之前是学金属的,没接触过细胞生物学方面知识,一切都得自己慢慢摸索,感觉挺困难的,希望能在这里和大家好好交流交流。另外,大家做过免疫荧光染色么?为什么同一组别做的骨桥蛋白的免疫荧光没有阳性结果呢?一抗的稀释浓度是按说明书上来还是得自己摸索啊?
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沙发
发表于 2011-9-29 15:06 |只看该作者
冲洗的不足,次数少,背景着色,反差差一些!!!!!!
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藤椅
发表于 2011-9-30 01:07 |只看该作者
背景算是洗干净了,但是采图时候焦距没调好,钙结节轮廓不清晰,且诱导结果不是很理想,如果方便,请贴出诱导条件,染色过程,否则不好判断问题出现在哪
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板凳
发表于 2011-9-30 01:10 |只看该作者
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这张图片无法判断,最好设置对照组,就容易区别了。另外硝酸银染色也可以试试,个人感觉这个方法更经典,茜素红很容易非特异性着色。OPN免疫荧光没有做出来,也不能说明不表达,第一次做建议使用将成骨细胞骨向诱导一段时间后作为阳性对照,摸索抗体及免疫荧光条件。
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报纸
发表于 2011-9-30 02:00 |只看该作者
请问一下在诱导的过程中是否出现很多的圆亮的细胞?
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地板
发表于 2011-9-30 08:30 |只看该作者
背景色比较深,最好做个对照看看。
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发表于 2011-9-30 08:52 |只看该作者
回复 zerollx 的帖子
' C3 Y& Q4 L( N# `" W! m, s; e" X! P) K8 {9 P/ b; p' e, w! c
请问zerolix,如果出现圆亮的细胞说明什么呢,钙化了?谢谢!

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发表于 2011-9-30 08:53 |只看该作者
回复 hygene 的帖子
7 z4 w& f, i5 ]# U) [
1 S# }7 C- [6 R. E' ~( b2 x/ D4 j+ G请问,如何做对照?用什么细胞做?

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优秀版主 金话筒 优秀会员

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发表于 2011-9-30 11:34 |只看该作者
本帖最后由 zerollx 于 2011-9-30 11:36 编辑 . q( c7 p4 X! \/ h2 K
! Z  P, B( a) T! @2 V
回复 lifangamanda 的帖子0 n5 i6 [7 ?2 }" ]

6 y5 k( s& B0 y  K! o: M这个我也不太清楚,我诱导的细胞中出现很多这样的细胞集落,近期准备做茜素红染色鉴定,不知道你做的过程中有没有出现这样的情况?
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发表于 2011-10-4 00:03 |只看该作者
务必带上一个阴性对照
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