hMSC成骨诱导分化茜素红染色

littlefriend

我做的MSC成骨分化的茜素红染色，这样算是阳性结果吧？之前是学金属的，没接触过细胞生物学方面知识，一切都得自己慢慢摸索，感觉挺困难的，希望能在这里和大家好好交流交流。另外，大家做过免疫荧光染色么？为什么同一组别做的骨桥蛋白的免疫荧光没有阳性结果呢？一抗的稀释浓度是按说明书上来还是得自己摸索啊？

tjbone

冲洗的不足，次数少，背景着色，反差差一些！！！！！！

YZ-WM

背景算是洗干净了，但是采图时候焦距没调好，钙结节轮廓不清晰，且诱导结果不是很理想，如果方便，请贴出诱导条件，染色过程，否则不好判断问题出现在哪

可怜的孩子

这张图片无法判断，最好设置对照组，就容易区别了。另外硝酸银染色也可以试试，个人感觉这个方法更经典，茜素红很容易非特异性着色。OPN免疫荧光没有做出来，也不能说明不表达，第一次做建议使用将成骨细胞骨向诱导一段时间后作为阳性对照，摸索抗体及免疫荧光条件。

zerollx

请问一下在诱导的过程中是否出现很多的圆亮的细胞？

hygene

背景色比较深，最好做个对照看看。

lifangamanda

回复 zerollx 的帖子# u5 O- v& z/ i% ~" N1 F
, l$ E! e2 e* A) L" O
请问zerolix，如果出现圆亮的细胞说明什么呢，钙化了？谢谢！

lifangamanda

回复 hygene 的帖子# W0 {- x7 {8 e  n8 b

; n% V8 f, Q; k  i( M. e请问，如何做对照？用什么细胞做？

zerollx

; T  e- L  l) ]# m0 j% V
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; @1 U2 D$ E8 f' w3 f/ |' i" p0 V, g. ?3 e. V! p+ ]
这个我也不太清楚，我诱导的细胞中出现很多这样的细胞集落，近期准备做茜素红染色鉴定，不知道你做的过程中有没有出现这样的情况？

金戈

务必带上一个阴性对照