hMSC成骨诱导分化茜素红染色 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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查看: 52075\|回复: 16	go hMSC成骨诱导分化茜素红染色 [复制链接]

littlefriend

新手上路

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楼主

发表于 2011-9-29 14:22 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我做的MSC成骨分化的茜素红染色，这样算是阳性结果吧？之前是学金属的，没接触过细胞生物学方面知识，一切都得自己慢慢摸索，感觉挺困难的，希望能在这里和大家好好交流交流。另外，大家做过免疫荧光染色么？为什么同一组别做的骨桥蛋白的免疫荧光没有阳性结果呢？一抗的稀释浓度是按说明书上来还是得自己摸索啊？

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tjbone

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沙发

发表于 2011-9-29 15:06 |只看该作者

冲洗的不足，次数少，背景着色，反差差一些！！！！！！

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YZ-WM

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藤椅

发表于 2011-9-30 01:07 |只看该作者

背景算是洗干净了，但是采图时候焦距没调好，钙结节轮廓不清晰，且诱导结果不是很理想，如果方便，请贴出诱导条件，染色过程，否则不好判断问题出现在哪

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可怜的孩子

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板凳

发表于 2011-9-30 01:10 |只看该作者

这张图片无法判断，最好设置对照组，就容易区别了。另外硝酸银染色也可以试试，个人感觉这个方法更经典，茜素红很容易非特异性着色。OPN免疫荧光没有做出来，也不能说明不表达，第一次做建议使用将成骨细胞骨向诱导一段时间后作为阳性对照，摸索抗体及免疫荧光条件。

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zerollx

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报纸

发表于 2011-9-30 02:00 |只看该作者

请问一下在诱导的过程中是否出现很多的圆亮的细胞？

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hygene

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地板

发表于 2011-9-30 08:30 |只看该作者

背景色比较深，最好做个对照看看。

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lifangamanda

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7楼

发表于 2011-9-30 08:52 |只看该作者

回复 zerollx 的帖子) h7 i6 T; ^. k) Y* r2 Y
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请问zerolix，如果出现圆亮的细胞说明什么呢，钙化了？谢谢！

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lifangamanda

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8楼

发表于 2011-9-30 08:53 |只看该作者

回复 hygene 的帖子
, S2 w) c P0 f* @0 Q+ I
请问，如何做对照？用什么细胞做？

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zerollx

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9楼

发表于 2011-9-30 11:34 |只看该作者

本帖最后由 zerollx 于 2011-9-30 11:36 编辑
4 J% t! i4 ~, j8 j) s1 a" p
回复 lifangamanda 的帖子

这个我也不太清楚，我诱导的细胞中出现很多这样的细胞集落，近期准备做茜素红染色鉴定，不知道你做的过程中有没有出现这样的情况？