RNA提取出来了，2次2种方法，但电泳都没有条带，抓狂~~

feihua011

你的说法应该是RNA降解了，一点条带没有了  含蛋白也会很低，但一般很难出现1.45的   有蛋白污染  电泳会看到条带的

sciencezhu

我一般使用Trizol裂解收集RNA，提取的步骤也没什么特殊就是按照说明书上的protocol来做的，测浓度最好是在0.3-0.8ug/ul比较好，OD260/OD280最好是在2.0附近比较纯。

cronos0910

RNA的浓度是多少？single strand本来就不易染色，要150ng以上才必较明显* f7 i# g6 C6 j) I
而且你的260/280及260/230都不好,我们实验室就要求260/280要1.9-2.0, 260/230要2.0以上( ~2 k; |# S2 V" {* I& Y
最大的问题应该是你的样本很少,就算RNA degradation也会有残留; m1 y5 M$ b' Y
一点意见供你参考

anti

是不是RNA酶污染了，而且nanodrop 的数据有时候是不太准确。

wenyangapple

凭个人经验，估计是降解了，加完氯仿，离心取上清的时候千万不能贪多，否则蛋白层会污染水相的。

wangshumin12311

兄弟，你细胞果真忒少点儿了，，，trizol按100ul量来加，异丙醇注意混匀，，，最后用不超过5ul去溶解，，，用1ul跑胶，0.5ul测浓度，，，有东西并符合条件就赶紧RT了，，太少了细胞

一转身的距离

细胞量太少了吧？你的260:280的值太低，看样子肯定有蛋白污染。你也没有给出浓度值，所以不知道你最后跑胶用的多大RNA量，不好评价是不是RNA太少。建议你下次RNA电泳前槽子里的水都重新换过，可以电压稍高一点，时间跑短一点，这样也可以降低RNA在跑胶过程中降解的可能性。

bjman10016

如果连rRNA的条带都没有，或者弥散一片，应该是降解了。注意溶剂、离心管是不是RNase Free的。RNase非常稳定啊

fang135796

细胞数量好像有点少，试剂盒提取的话说明书上应该有细胞数的说明的。你提出来的RNA浓度是多少？A260/A280有点低，可能是蛋白质污染了，可能有RNase污染，RNA降解了。操作时要注意能少说话尽量少说，最好戴上口罩。另外要确保用的东西都是RNase free的。

Tonypan

我也觉得讲解的可能性比较大