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楼主: Demon_820
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脐带间充质干细胞培养基问题!   [复制链接]

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发表于 2011-10-10 10:50 |只看该作者
原代细胞培养用stemcell培养基,传代培养用AMEM,添加10%进口胎牛血清。培养效果非常好。
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发表于 2011-10-10 17:30 |只看该作者
同意用进口血清,国产血清质量不太稳定。但是如果只加血清不加细胞因子的话,细胞也非常容易老化。建议加入EGF、bFGF等细胞因子,浓度在1-10ng/ml即可。
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发表于 2011-10-11 10:17 |只看该作者
我们实验室用的是高糖的DMEM,加10%进口FBS,另加细胞因子EGF.还有加了非必须氨基酸,谷氨酰胺。
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发表于 2011-10-12 09:42 |只看该作者
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我们是胎盘间充质干细胞的,在进行培养时最好用heclone的DMEM,fbs用bioind的金牌胎牛血清,10%的量。牛血清是我们经过几个月筛选出来的,细胞增殖倍数最好的,我们的细胞已经供应临床使用了。
' C7 _7 v$ b1 [. Y4 O不知道你是实验用,还是临床使用,临床最好不要使用血清培养,如果供临床的话建议改用无血清培养。
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发表于 2011-10-12 20:48 |只看该作者
间充质干细胞的培养,最好用A-MEM培养基,另外,加进口血清,使用量为10%,
5 U+ n( d+ Q" I9 I3 H7 `当然,用无血清培养基培养会更好,特别在细胞增殖方面更优于血清,0 b$ P3 V1 K! r3 W# O6 A; {' Y3 ~
至于,一些因子本人认为可以不加,好的血清已经有助于保持细胞的活性
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发表于 2013-5-6 12:36 |只看该作者
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7 ?$ {( W2 X, q: Z+ n( t4 z
6 g" ^# e' R# y+ v% i传代细胞使用的FBS浓度要不要降低?浓度高了会不会使细胞容易分化,老化?
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发表于 2013-5-6 12:37 |只看该作者
回复 君鸿 的帖子
6 P* O" [# V, `% `1 l6 Q9 b' E( x% J6 |' Z3 h6 B& _+ Z$ W( r
传代细胞使用的FBS浓度要不要降低?浓度高了会不会使细胞容易分化,老化?

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发表于 2013-5-6 13:02 |只看该作者
DMEM/F12+FBS(用澳洲胎牛血清、这个很关键)+L-G+双抗即可,培养出来的细胞形态良好,P5代流式检测MSC在95%左右!
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发表于 2013-5-6 13:48 |只看该作者
你要是着急的话培养基可以买现成的,有的公司会有自己的一套间充质培养基,我们实验室配的好像是DMEM+10%FBS+谷氨酰胺+bFGF,用的都是进口的
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发表于 2013-5-6 14:13 |只看该作者
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. ?( Z) g7 ?" ?6 f6 g5 h! D0 b% Q1 f# X. c
你好,我想问下的是不用血清的话,除了DMEM+谷氨酰胺+BFGF外,还要加什么吗
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