脂肪干细胞成骨诱导，出现很多圆亮集落，惑？

Yorkshining

最近做小鼠脂肪干细胞的成骨诱导，诱导体系如下：
( B; M- V4 I( G+ ^& w" e6 P) O    分别做了3组，12孔板接5万细胞、6孔板接5万细胞，六孔板接1万细胞3个处理组，第二天贴壁后即换成骨诱导液：诱导液的充分如下：/ z4 w# ]8 J6 B+ u
双抗、地塞米松（10nM），beta-甘油磷酸（10mM），Vc的2钠盐（50ug/ml），10%FBS，成骨诱导28天后，仅12孔板5万组出现好多圆亮的细胞集落，如下图
7 M9 t/ ?, N* m: j8 r/ D- v. \# g

, C1 q* u$ }9 J% K$ R& }% k1 n! {  t; n, V  z
2 `, ]6 I4 u. X# v
茜素红S染色后，没有出现典型的矿化结节，低倍镜下看不到红色，但是400x下可看到个别细胞被染成红色，如下图：
8 w% i: F7 s% N, P! x3 r; Q( U2 D  J: x/ w
! u" j! E: E+ [* r  O9 h% ]* {
4 Q! `& U5 B6 ?/ s- H7 e- p' k7 @; W
( f. h. P1 f, w5 ^* a$ A
请大家指点一下，还有茜素红与茜素红S到底有什么差别，成骨诱导时用后者有问题么？

meister

图片太不清楚了，难以鉴别

都市青蛙

我第一次做的时候跟你后面2张比较相似，当时也误认为是结节，后来和师兄讨教，他们都说做MSC很难诱导出特别典型的结节，而且那个染色后也不会出现全都是结节的样子。/ O# p4 R4 D3 b
我做完染色，在10倍镜下就能看到红染的了。

ljzmy82

多看看文献，这个已经很成熟了，不是个难题

Yorkshining

回复 都市青蛙 的帖子, l8 [+ {& a* S( F6 l
* b1 F: m7 y) r% P1 o- |
那您认为这个问题主要出在什么地方呢？

sdyinong

之前做过这个实验，实验不难，所分离的细胞做过其他的鉴定吗？再就是看看染色试剂是不是有问题

秋星盏

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8 [* T0 `- g) W
8 @* B: T1 R7 ?9 n% K$ h应该是用茜素红S吧。