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[请教] 跪求细胞单克隆技术 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-10-14 16:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
    小弟最近做细胞单克隆,用有限稀释法做得让我崩溃。想向高手求救,有什么好的方法可以更快速,更高效得到单克隆细胞吗?跪求各位大侠了,什么方法都可以,花多少钱也无所谓。

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沙发
发表于 2011-10-14 22:17 |只看该作者
先来个细胞计数成不 在来个稀释 再者去细胞的时候 取少点啥
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藤椅
发表于 2011-10-14 23:05 |只看该作者
本帖最后由 naturalkillerce 于 2011-10-14 23:06 编辑 ( q' v. l  c7 C8 U: K: p& M* }

, w% b0 l! D% ~. h9 \6 V回复 bin 的帖子
# Q* @) P, Y, v+ Q% l0 w1 h& v0 V# p3 [$ X$ u
简单些的,用个96孔细胞培养板培养一下,可以按照每三列一个梯度进行稀释,按照初始细胞密度高低,选择合适的稀释倍数。经过培养好,挑选只有单个细胞团的孔,当然一般至少需要经过2至3轮的筛选,才能得到细胞单克隆。
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板凳
发表于 2011-10-24 09:56 |只看该作者
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用酶将细胞解成单个细胞再培养如何
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报纸
发表于 2011-10-24 11:47 |只看该作者
用纤维操作仪,转移一个细胞还是挺方便的
8 t: V0 n: z6 y7 _( F. E5 O之前做单细菌培养,用显微操作仪就比较方便- n( Y$ Z% \( z$ m: m
单细胞更容易些
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地板
发表于 2011-10-25 11:26 |只看该作者
在96孔板里连续稀释几个孔,稀释到哪个孔的细胞数有100个左右,用那个孔的细胞铺板
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发表于 2011-10-25 15:39 |只看该作者
单细胞克隆通常用有限稀释法,这个方法操作简单,也省时省力。
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发表于 2011-10-25 17:08 |只看该作者
带有分选功能的流式细胞仪可以把单个细胞打到孔板里,caliber什么的应该就可以吧。96孔板加了培养基直接接。就是有点费工费成本,呵呵,对细胞伤害不大
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