关于mES成骨诱导

nibirucome

一直在做的mES成骨诱导的实验，但是总是失败不知道是什么原因，还请坛子里做过这方面的前辈帮忙！+ v+ S8 N; U8 j" ^
下面是我的具体做法：把mES细胞接种在明胶板上形成明显的克隆以后改用成骨诱导培养液，发现3天左右克隆周围有细胞分化，分化的细胞大约可以继续生长3d左右就全部死亡，隔天换液。& K5 {) H' [' M$ u% O# E, G1 V: W
成骨诱导液：10mM β-磷酸甘油纳（sigma）50ug/ml（sigma）Dex 5X10-7M（国产）10%FBS（gibico）
: J& |1 F/ |5 C0 g" T. L在分化较好的细胞上发现一些疑似ES细胞的克隆，但是诱导液里面并没有加LIF怎么会有克隆生长？