求教：成纤维细胞原代状态不好的原因

星移龙一

我没有权限接受你的好友申请，对不起！！！

牙牙丫丫123

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那意思是你们使用的是贴壁培养法？不是酶消化法？
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星移龙一

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: P5 I, q$ c1 D( l1 s6 `
% d8 {  `; F) c  Z) ]. \恩  

narajie

第二幅那种黑点应该是血清的问题吧，但是好像影响也不太大...之前我养人的成纤维也这样过...

huangcong1988

我觉得 如果你最下面那个图是在高倍镜下看的话，里面猪成纤维细胞还行，但是低倍镜下，那细胞密度就有点小了。上面几幅图里面应该是被污染了，你说有小黑点，是不是黑胶虫？在细胞之间吗？还有，看图我觉得你的细胞不太均匀，消化以后一定要吹打均匀了再分装，不然细胞不均匀，在细胞密度稀的地方肯定会长虫子的，而且你可以试着提高DMEM中FBS含量，用20%或许效果会好点。图中的小黑点，不出意外的话，应该是黑胶虫

dandan9230

可以检测一下支原体，PCR法很快的

牙牙丫丫123

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1 h. j2 \& t& E9 y" K8 s/ g6 q7 D4 {* a
请问黑胶虫会动吗？我这个小黑点是长在细胞表面的……

huangcong1988

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可以的，你转高倍镜下看，可以看到细胞之间的小黑点，是能看到它移动的

liuyul03

从你的图片来看，首先你在做细胞接种时没有混匀，有的地方过于密集，形成复层，而有的地方还没长。最后一张图片还可以，但也有老化迹象啦。

wangshumin12311

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天呐，没想到随便都能碰到母校的学生，，你是刘忠华老师那边的吧，，，没关系，成纤维细胞重新做，状态不好就扔了