求助：请大家帮忙看看为啥我养的内皮祖细胞长不起来

moqisha

大家好，我养内皮祖细胞有几个月了，每次都是抽取至少60ML的人外周血，按文献说的，梯度密度离心法分离血液中的PBMC，然后用EGM- 2培基培养。可是培养的细胞有时候能长得很好，可是有时候就是长不起来，可以看到单个的内皮祖细胞，可是就是没有克隆增殖，请问是为什么，大家又遇到过这种情况吗，是怎么解决的啊？谢谢。

zz091115

你用了纤连蛋白了么？还有接种密度也会影响的 要么你杂细胞太多 竞争性把EPC挤得不行了

千里草

首先分离的单个核细胞要好，即白膜层清晰，然后就是培养中要加些生长因子吧 ，再就是接种后不要太早换液 一周左右再看  ，以前论坛里有类似的讨论 你可参考一下

youndie

你的单个的内皮细胞是什么样的？可否上图。

moqisha

zz091115 的建议很好，我也觉得最开始的接种密度要把握好，只是不知道一般密度多少最好。

sirius_zou

LZ是否用胶原包被？6 e3 y4 G5 X0 `( C, ~7 Q. T: G1 s
接种密度如何？
6 r0 h6 m% w/ h培养基中添加生长因子。