求教，流式分选后细胞在收集液中放置5小时后，离心不下来，怎么会事？

songtianlong

求教，流式分选后细胞在收集液中放置5小时后，离心不下来，怎么会事？

meister

不会离心不下来的， 是你的操作有问题，或者细胞没有了，丢失，碎裂

新疆八钢

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3 e$ w4 g, v8 C7 f5 q. s! }$ }
3 G- o2 E' A, t* [是你的细胞离解了，可能是你在反复重悬细胞的时候用力过大，细胞分选的过程中，由于重悬次数太多。建议你用力适当，避免损伤细胞。

songtianlong

回复 meister 的帖子! Z3 W7 z% X9 T+ [' n
9 @1 a3 H9 S1 C
可是在镜下可以看到完整细胞

songtianlong

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可是在镜下可以看到完整细胞

meister

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7 R& S1 ^3 o) V
7 _) v. r( g0 d, Z加入培养基或者PBS稀释，然后加大离心力看看。

新疆八钢

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9 Z) F& k/ e" p4 F1 M, w6 P* r( k  u- T. R
你用的转数是多少，试试加大转数，尽量不要增加离心时间

dragon513

如果1000rpm离心5min还离不下来的话可能真得担心会不会是振荡时用力过大把细胞弄碎了。上流式也会发现有很多碎片的。

Tonypan

为什么说细胞没离心下来？看不到嘛？

linzi214

可能是你得到的细胞数量太少了，以至于你没有看到沉淀。可以混匀后取一部分出来1000rpm离心5min收集细胞，然后再重悬起来在显微镜下观察有没有细胞