如何确定是转基因小鼠

fang135796

现有绿荧光转基因小鼠，除了基因鉴定还有其他方法吗？要是用睾丸组织的免疫组化进行鉴定，请问要怎么做才能确定是转基因小鼠呢？谢谢了。

naturalkillerce

回复 fang135796 的帖子
# D6 g. y  q! E0 D& L6 D6 G9 y$ M) k" \5 P+ M, h
其实也可以提取整个含有转基因的细胞的DNA，然后用PCR扩增，跑电泳，看没有相关条带出现，若要定量的话，可以采用qPCR。

aminhair

哈哈！做切片，看荧光吧！

naturalkillerce

回复 fang135796 的帖子
& t! j0 k% W& [# \4 c( a8 A/ j  T( L' u4 U3 r3 H( }9 o3 T
是啊，本来就可以利用转基因表达后产生的绿色荧光蛋白，在荧光电子显微镜下观察即可。要是用睾丸组织的免疫组化进行鉴定的话，也可以采用原位杂交技术进行鉴定。

8231946

可以设计绿荧光基因引物，进行PCR。也可进行成纤维细胞的培养在显微镜下观察是否有绿荧光

爱鬼鬼

1看转基因所用的所用的启动子，再看绿色在何种组织何时表达，不过要杀掉小鼠. Q: Z- D/ {* n7 A
2还是剪尾，提DNA，PCR方便

279042256

光PCR鉴定不保准吧，容易假阳性，还是看蛋白表达情况，可以做个WB，不过这是绿色荧光蛋白的就省事了吧，直接激发看不就得了吗？

星移龙一

可以做一下小鼠原代培养，然后荧光下看是否有绿色荧光。

chutu

PCR鉴定转基因小鼠就很可靠。常规做法是剪一小段尾尖提DNA样品。当然，既然是GFP转基因，看是什么组织表达的，直接荧光显微镜观察或者做流式细胞监测不就行了

trl137

鉴定是否为转基因小鼠，主要还是要从基因水平上检测。既然带有荧光，就可以设计相关的引物，提取基因组DNA，PCR即可