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[其他类别] 关于培养基 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-10-26 22:37 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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1.Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)$ F" m2 {0 Y, s! y# t) j" o: Y& ^6 ^
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)是在Basal Medium Eagle(BME)基础上改进而来。其中氨基酸浓度为BME的4倍,根据葡萄糖(glucose)的浓度高低分为“高糖(4500mg/L)”和“低糖(1000mg/L)”两类,相对BME,DMEM含有多种添加成分。DMEM首见于小鼠胚胎细胞培养,其后各种改进型广泛用于原代细胞,非转化和转化细胞的培养。各种DMEM的区别主要在于L-谷氨酰胺(L-glutamine),丙酮酸钠(Sodium Pyruvate)的不同组合以及是否含有酚红(Phenol red)等。& O; R: A4 Z. m5 F2 v6 m% W

( I  t0 P' H4 t1 O: R# M2.Minimum Essential Medium (MEM)
4 K2 d# L. U" @Minimum Essential Medium (MEM) 由Harry Eagle于上个世纪50年代开发的培养基工艺,是最常用的细胞培养基之一,早期应用于正常哺乳动物成纤维细胞和特定HeLa细胞亚系的培养。相对于Eagle’s Basal Medium (BME),MEM中添加了细胞必需的营养成分,随后的研究) V$ p0 Y* ]: ~: h" P: H
显示这些添加的营养成分对大多快速增殖的细胞有促进作用。MEM含有较高水平的氨基酸,接近于培养的哺乳动物细胞的组分。MEM广泛用于支持单层细胞的生长,选择性添加非必需氨基酸和Hank’s/Earle’s盐更进一步扩大了MEM的使用范围。另外降低培养基中钙离子含* k0 {3 l5 f2 ]6 V
量适用于悬浮细胞的培养。
* e) v) y, V; T6 N
! N  t$ F+ ~5 h3.DMEM-Ham's F12
2 p( S0 A1 i/ p5 O- x  iDMEM-Ham's F12为研究人员开发用于无血清细胞培养之需。取代培养基中的血清添加,该培养基添加有混合营养成分,生长因子和激素。Mather和 Sato 曾报道添加有胰岛素(insulin),转铁蛋白(transferrin),(表皮生长因子(epidermal growthfactor),促黄体素(luteinizing hormone,LH)或者促卵泡素(follicle stimulatinghormone,FSH),类胰岛素生长因子(somatomedin)和生长激素的无血清培养基成功培养了Leydig细胞和Sertoli细胞。尽管针对不同的细胞使用激素的含量不同,1:1比例混合的DMEM和Ham’s F-12对多数细胞比较适宜。15mM的HEPES常用来为该培养基提供酸碱缓冲体系,补偿无血清添加造成的培养基缓冲能力不足。" q' c4 }- F9 U% ~1 [

7 Q# h! o. g' a4 P4 p& G
- Q, m- [2 H- G$ D  c* [- p7 E3 o  L+ i# W- F8 _" ^. Q
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沙发
发表于 2011-10-27 12:07 |只看该作者
那么培养脐带间充质干细胞,用哪种培养基效果最好?或者混着用,怎么混?有高手做过类似的实验吗?
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藤椅
发表于 2011-10-27 13:55 |只看该作者
用低糖的DMEM 加上10%血清 以及bFGF就可以了
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板凳
发表于 2011-10-28 10:00 |只看该作者
andylee824 发表于 2011-10-27 12:07
* T/ [) q( _& p9 I6 o那么培养脐带间充质干细胞,用哪种培养基效果最好?或者混着用,怎么混?有高手做过类似的实验吗?

% F1 B1 C% J2 c: k; R% h按版主介绍的来看,应该是用DMEM-Ham's F12比较好,不过价位应该也是这3种里面最高的。
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报纸
发表于 2011-10-28 10:24 |只看该作者
既然F12价格高,我有个想法,原代用F12,P1代以后用DMEM如何?
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地板
发表于 2011-10-29 11:13 |只看该作者
哈哈 用DMEM 或者1640   基本能满足大多数细胞的需求,,血清可以选着胎牛血清或者小牛血清。。
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发表于 2011-10-30 11:03 |只看该作者
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$ Q. b0 h) f% ]/ `* K6 P% @' F6 ~/ g/ \; F6 D2 b: w
你的想法很不好,细胞培养环境尽量保持一致,变则乱
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发表于 2011-10-30 12:49 |只看该作者
1640培养基与上面介绍的几种培养基有什么区别吗?
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