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新手上路

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楼主

发表于 2011-10-27 10:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

为什么磁珠分选后的小鼠造血干细胞中有很多红细胞？如果提RNA做PCR的话，会不会有影响

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Tonypan

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沙发

发表于 2011-10-27 12:11 |只看该作者

如果是用c-kit Sca-1阳选的话怀疑分选柱冲洗好，或者分选柱堵塞了。

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meggie

新手上路

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藤椅

发表于 2011-10-27 16:16 |只看该作者

我们也存在这个问题，我觉得是淋巴分离液分离那一步的问题

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优秀会员金话筒

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发表于 2011-10-28 09:27 |只看该作者

分离，冲洗的不干净。ficoll离心时间加长

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catheryne

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报纸

发表于 2013-9-22 20:54 |只看该作者

若从骨髓中分离造血干细胞：应该在获取骨髓细胞后破红，然后用细胞分离液获得较为纯净的骨髓单个核细胞，最后过分选柱。这样就不会有红细胞掺入了。

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catheryne

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地板

发表于 2013-9-22 22:25 |只看该作者

即使有红细胞掺入，如果也不会影响提取mRNA的质量，因为红细胞内只有已合成的蛋白质。

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sc-cxw

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7楼

发表于 2013-9-26 16:35 |只看该作者

抗体包被磁珠对死细胞、红细胞常有非特异性结合。故而分选前去除死细胞、红细胞（如通过Ficoll分离去除）可以提高分离的效果。详情可以参照http://wenku.baidu.com/view/16ef88100b4e767f5acfceac.html

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uniondaivd

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8楼

发表于 2013-10-17 20:47 |只看该作者

那就是在分离小鼠骨髓细胞后制作的细胞悬液首先用红细胞裂解液处理，再分离和分选就不会这样了，希望有所帮助。

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