脐带间充质干细胞软骨分化相关问题

taoqilh

在诱导成软骨的分化中，订购的试剂上说需要用细胞培养管，接种离心后不重悬，保持沉淀状态下换液，请问是为什么，能用细胞培养瓶或者无菌的离心管代替吗* V6 C/ N+ ?$ ~% @7 V

wangzhiqi86

你说的应该是团块诱导，这是最经典的软骨分化方法。软骨分化需要有大量的细胞聚集，而团块诱导时的细胞密度可达到10×107cells/ml，这模拟了体内软骨分化的最初阶段。而软骨分化的培养基中没有加入血清，离心之后，细胞沉淀在试管底部，这时加入诱导培养基后一到两天的时间，底部就会自发聚团，而且随着诱导时间的延长，由于细胞分泌了大量胞外基质，团块会慢慢变大，而且硬度增加。
3 K- F, o# R9 I我做团块诱导就是用10ml的离心管，培养时，盖子稍微拧松点，没有问题。

taoqilh

回复 wangzhiqi86 的帖子. @" v3 {2 Y, n& `' Y. ~5 J# Q
, F# z7 r+ m2 ?8 j3 n! u, A- @+ b
非常感谢，呵呵，受教了

willow0711

wangzhiqi86 发表于 2011-11-4 12:10 * T3 i# B7 n  T6 n6 C% Z/ Z: I
你说的应该是团块诱导，这是最经典的软骨分化方法。软骨分化需要有大量的细胞聚集，而团块诱导时的细胞密度 ...

! E6 g8 B7 E: @& \8 h( \. j你好，我想问下你这种团块诱导软骨是不是要做成切片？用什么方法进行鉴定呢？

wangzhiqi86

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% R, i$ X! I. W0 t9 u. g
: a& L: e* o/ m& `/ X6 W是的，冷冻切片和石蜡切片都可以，然后用番红O、甲苯胺蓝或者免疫组化染色都可以

willow0711

回复 wangzhiqi86 的帖子8 g5 `. }/ Z2 P7 q0 w& t
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谢谢!

ytumuyangren

回复 wangzhiqi86 的帖子& x- `- q0 Q2 L6 R' ~; ]8 [; o
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您好，想咨询一下，您的成软骨诱导液是自己配置的还是从公司买的现成的。如果是自己配置的能告诉配方吗？我按照文献上讲的做了很多次尝试，pellet随着诱导时间的延长在不断的变小。但是成脂成骨诱导均能诱导成功。希望您赐教一二。谢谢。