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楼主: imgaga
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我的骨髓间充质干细胞是不是老化了?有图片   [复制链接]

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包包
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发表于 2011-11-7 20:38 |只看该作者
上面那张(就是形态看似肥大的那张)是不是已经不是间充质了?而是上皮细胞或是别的什么细胞了??. m! S' @8 n) }! Y
貌似上皮细胞就是这样扁扁圆圆的。
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发表于 2011-11-9 09:34 |只看该作者
干细胞在培养过程中如果环境不适合其生长就会出现部分细胞的老化现象。这是干细胞培养的一个难点也是经常出现的问题。
8 K$ T/ r+ u/ n; l/ d  ~" L3 i5 \: P- Q& w
干细胞老化表现:
/ g& y$ O# y( o0 i5 y" o3 E
/ O& x% a1 y: L9 M细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒,表示细胞开始出现老化;
6 U3 k( D  `1 D- U细胞胞浆内出现空泡,则表明该细胞已老化或者已经开始分化(在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的); - V" W7 R7 H* s" x
细胞立体感逐渐消失,细胞间的间隔不清,部分细胞扁平状,细胞的形状趋向多样; , F9 [6 ~0 h2 j7 `8 M, t
贴壁性减退,出现一些漂浮的细胞; $ A0 i+ Z' M: E% f. {' b' `! t
部分分泌强的细胞分泌物增多,细胞表面会比较脏;
0 X3 |/ G4 b6 ~$ O细胞增殖速度明显下降,分裂相的细胞明显减少。' V- V; g( E' d4 _
干细胞老化的原因和预防:
! {) k8 C" i4 x+ h/ H/ _- J# i6 Z) A) Q! l- C' y; n1 k
接种密度的影响:部分干细胞具有一定的分泌性能,能够分泌一些对细胞有支持能力的因子类物质;所以必须维持一定的接种密度,否则会导致细胞增殖减慢,最后出现老化;
- U4 Z% g7 c$ i& v1 f消化过度:消化细胞时会对细胞的表面蛋白有较强的损伤,所以消化的时间不能过长,使用合适浓度和pH值的消化酶,否则会导致细胞老化和分化; ' K' ~8 y7 X7 ]: P9 r- a# M
合适的密度的时候就要传代:细胞如果过密,接触抑制作用会导致细胞的活力减弱并影响增殖导致老化;
4 g; m1 E% f4 @4 [- G5 f; m使用合适的血清和培养基:不同的干细胞对培养基特别是血清的要求不同,所以使用不同的培养用的血清进行筛选,寻找最适合该干细胞培养的血清是预防细胞老化,维持细胞正常生长的重要保证。
4 }; K/ V* k/ O) x9 S2 U: ~0 h( k
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新闻小组成员 优秀会员 金话筒

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发表于 2011-11-9 15:55 |只看该作者
细胞立体感逐渐消失,细胞间的间隔不清,部分细胞扁平状,细胞的形状趋向多样;

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发表于 2011-11-9 19:29 |只看该作者
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回复 yangwy028 的帖子
4 S% {4 M% a4 F( C! ]* z7 _
. i0 r* F! j0 j7 v$ P9 h根据老化的标准,我的细胞确实有嫌疑~~我用的是0.25%胰酶,消化5分钟,但是还是有很多消化不下来。你的胰酶是什么百分比呀?消化多久?
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发表于 2011-11-9 23:06 |只看该作者
前面一部分能消化下来的因该是间充质,后面不大消化的下来的可能是内皮细胞或者别的什么细胞吧,因为那些细胞贴壁比较牢。
3 P& f& p  N; y+ G; ]/ D0 y你可以试下分次消化后,放在不同的培养瓶里培养,看看有什么差异。
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发表于 2011-11-10 02:47 |只看该作者
学习啦。

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发表于 2011-11-11 11:14 |只看该作者
回复 imgaga 的帖子
- P% A+ n) w4 U) P) t: V, I6 y4 I: A
胰酶可以再稀释一下的,消化时间过长了!看到消化的上清液开始变浑浊就已经该开始准备终止消化了,这个时候去显微镜下看看,已经都变圆了,吹打几下就下来了
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