求解 兔骨髓间充质干细胞 附图

kgx1986

从细胞来看你应该是用的密度梯度离心法获取细胞。我觉得你第九天原代的细胞密度还不够传代要求，看起来连50%都不到。出现这种情况有可能在原代细胞就不好了，只是在形态上没表现出来，而增值速度会有明显减慢。这种情况下细胞是不好消化的，传代后细胞就像油煎的荷包蛋，没办法，只能丢弃。1 C; ]7 \5 j6 u3 c3 Z; v
如果第一张图你是拍的集落间细胞密度稀疏的区域，那么原代细胞可能就是状态良好，问题就出现在操作上面了，可能是消化过度，也可能是吹打动作不够温柔，等等。自己找一下原因，也可以让实验室做得好的同学或者老师示范给你看，找出自己的不足，提高改正。
, O+ |) q/ D- U" b, b实验中不仅要多动手，更要多动脑，祝你好运！

都市青蛙

密度依赖性还是很强的，下次可以种的密些; k. z5 t* O" t5 r' ~0 H' m  I' f
有些老了

不苦的药

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/ g  `( J( Q# a& D% o' Q  k4 V你用的什么分离方法，贴壁吗

不苦的药

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谢谢你有第一代的照片吗，可看看嘛

ytumuyangren

回复 不苦的药 的帖子" C- X2 J  ?+ m& Z
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我们直接采用的是全骨髓培养，没有采用密度梯度分离，因为是全骨髓培养，拍照的时候培养液里有很多红细胞，所以原代我们都不拍照，但是能看到贴壁的细胞。全骨髓培养的细胞，前三天千万别动培养瓶，等BMSC完全贴壁后，再摇摇培养瓶，让为没有贴壁的细胞创造空间再次贴壁，你可以尝试一下。

不苦的药

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5 D! w$ M2 s7 o6 y& @. _. P7 Y+ ~: c/ F8 n) W- `" d
谢谢，你用的兔子是几个月的，有多种

demonleaf

其实骨髓间充质用四季青养完全也是可以养出来的，估计不是血清质量的原因

ytumuyangren

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4 {+ p7 a, a& ^9 p& O6 w不好意思，最近比较忙都没时间上网，回复的晚了。我们用的兔子一般都是两周大小的，一个月大小的也用过，效果都还不错，关键一点是在操作过程中一定不要污染了，负责很麻烦，如果对自己的操作不放心可以加青霉素和链霉素，提前预防一下，祝你试验成功。

不苦的药

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7 C* ?3 L7 p3 O8 V3 M
谢谢你

不苦的药

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谢谢，我想问一下一个直径10CM的培养皿，接种多少细胞比较合适