求解 兔骨髓间充质干细胞 附图

kgx1986

从细胞来看你应该是用的密度梯度离心法获取细胞。我觉得你第九天原代的细胞密度还不够传代要求，看起来连50%都不到。出现这种情况有可能在原代细胞就不好了，只是在形态上没表现出来，而增值速度会有明显减慢。这种情况下细胞是不好消化的，传代后细胞就像油煎的荷包蛋，没办法，只能丢弃。
0 L: x' A9 ?6 ]; f如果第一张图你是拍的集落间细胞密度稀疏的区域，那么原代细胞可能就是状态良好，问题就出现在操作上面了，可能是消化过度，也可能是吹打动作不够温柔，等等。自己找一下原因，也可以让实验室做得好的同学或者老师示范给你看，找出自己的不足，提高改正。
8 E, e5 M. I  R' ]- j实验中不仅要多动手，更要多动脑，祝你好运！

都市青蛙

密度依赖性还是很强的，下次可以种的密些
. |* n0 X! d) Z4 H2 Z7 d有些老了

不苦的药

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你用的什么分离方法，贴壁吗

不苦的药

回复 ytumuyangren 的帖子, [3 E( L* d4 R, r+ f4 o3 o$ I
8 Z& T3 O/ Z' U+ `
谢谢你有第一代的照片吗，可看看嘛

ytumuyangren

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# y- f. N/ I. t& c, S我们直接采用的是全骨髓培养，没有采用密度梯度分离，因为是全骨髓培养，拍照的时候培养液里有很多红细胞，所以原代我们都不拍照，但是能看到贴壁的细胞。全骨髓培养的细胞，前三天千万别动培养瓶，等BMSC完全贴壁后，再摇摇培养瓶，让为没有贴壁的细胞创造空间再次贴壁，你可以尝试一下。

不苦的药

回复 ytumuyangren 的帖子6 i1 v, Q4 I/ n8 o% n7 X

( [3 h+ b+ n# @8 c$ l5 u谢谢，你用的兔子是几个月的，有多种

demonleaf

其实骨髓间充质用四季青养完全也是可以养出来的，估计不是血清质量的原因

ytumuyangren

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' z/ w& f0 L% S0 u4 s7 `' ?/ j: N8 v6 h8 H4 D8 O
不好意思，最近比较忙都没时间上网，回复的晚了。我们用的兔子一般都是两周大小的，一个月大小的也用过，效果都还不错，关键一点是在操作过程中一定不要污染了，负责很麻烦，如果对自己的操作不放心可以加青霉素和链霉素，提前预防一下，祝你试验成功。

不苦的药

回复 ytumuyangren 的帖子$ I" D& j/ v: e8 f

- h4 H+ H% }, k0 B, j, I谢谢你

不苦的药

回复 都市青蛙 的帖子$ y/ z6 o$ u4 n0 {
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谢谢，我想问一下一个直径10CM的培养皿，接种多少细胞比较合适