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求解 兔骨髓间充质干细胞 附图   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-11-8 22:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
原代第九天40X7 r; P5 P8 H* g% `
原代传代后第一天变成
" A9 x* I% O2 O) o- t: l  N+ m! g这还是骨髓间充质干细包吗/ \$ h6 f0 F+ o. S4 |" t  z
6 ]  W4 q5 w  z4 y9 ]( B

& j% C% y; ]% h! @+ q
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沙发
发表于 2011-11-8 22:38 |只看该作者
本帖最后由 hnsdlgl 于 2011-11-8 22:41 编辑
" q# s! `8 |7 n, R! d" P. Z9 n& G+ |) R. i7 C1 S
原代的形态为长梭形或多角形,应该是骨髓间充质干细胞,传代后的也还基本还是,但已经不能进行实验了。
$ i3 w( D" k2 u/ V, R% l9 r' i
/ b2 [2 x$ a+ R/ n) c! ~我认为造成这样现象的原因有两个:1. 传代时胰酶消化过度、或传代操作时间太长,导致细胞受伤了;
. Q7 J0 r7 p$ F+ q                             2. 血清没有选对,据我所知,这种细胞对血清和培养基很挑剔。  
" Q8 F. M6 {: b& {$ C! X4 F- F
我以前也养过人的骨髓间充质干细胞,老是养不好,后来经过反复筛查,发现主要是血清的原因,其次培养基也有一定作用。后来买了广州一个公司的专门培养基后,才彻底解决骨髓间充质干细胞养不好的问题。不过该培养基套装比较贵,通常打完折后,一个500ml的套装需要800-1200元,这得看你们老板是否愿意花这个钱。不过,不管怎样,血清必需是进口的。
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藤椅
发表于 2011-11-8 23:11 |只看该作者
回复 hnsdlgl 的帖子3 W9 }& _8 Y, ~8 j8 ~

) I! I0 y* n  A$ A( X2 G谢谢,血清是什么牌子的

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板凳
发表于 2011-11-9 08:11 |只看该作者
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回复 不苦的药 的帖子
- I1 n) {  z. Q  l
7 G& D, E! T2 m传的太稀了,1传2试试。你这细胞老化了
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报纸
发表于 2011-11-9 09:07 |只看该作者
细胞形态变异,可能是血清浓度太高了,或者传代密度太低,要不就是胰酶消化过度。
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地板
发表于 2011-11-9 09:14 |只看该作者
血清浓度高时会出现这种情况,消化时还会大片脱落,不是单个的圆缩。
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发表于 2011-11-9 10:02 |只看该作者
本帖最后由 hnsdlgl 于 2011-11-9 10:03 编辑 - g/ u3 [2 m7 @7 J* L
8 f' E3 k, Z" l
回复 不苦的药 的帖子
! z7 E" \" m4 O9 U$ @1 S" F8 C  {, L. R: ]; a! l0 T$ a( c
血清我用的是Gibco的,一瓶500ml 的3000元左右,看当时的折扣了。
5 q* C0 r# F% t' h

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发表于 2011-11-9 10:04 |只看该作者
iceyang 发表于 2011-11-9 08:11   Q" {3 F% L9 V/ u$ s
回复 不苦的药 的帖子1 I, q7 q) ?& h
! g- s# A2 k) c: s( `6 G0 J* d
传的太稀了,1传2试试。你这细胞老化了

0 a4 x' q6 |0 C8 J从他左下方的图来看,传代似乎不算太稀
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发表于 2011-11-9 10:10 |只看该作者
MSCs还是比较好养得,国产的四季青的血清都不错呀,我们实验室就用这个才两百多呢
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发表于 2011-11-9 10:56 |只看该作者
看着你的细胞都已经肥大了,是传代过希的状况,我们实验室里培养兔BMSC挺好养的,国产血清都可以养活,原代的一般在第7天就已经长满10cm的培养皿了。
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