细胞冻存时浓度多少合适？

刘森泉

我觉得10的5次6次7次关系都不是很大，关键是冻存的步骤和其中的细节，还有冻存液组分配比。常见的细胞的话应该都容易，像ES和iPS这种就需要多注意，多查查问问。

haiq1984

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我用的培养基：血清：DMSO=5：4：1，想请问下这个配比合适不呢？

刘森泉

其实我们教学推荐冻存浓度是1-5*10E-5，但实际我们每次一个平皿长满冻存1-2管，肯定比10E-5大，也没有去摸过到底冻存效果怎么样，反正复苏后都挺好。
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我们培养基：血清：DMSO=6:3:1，但是我想血清多10%关系也不是很大，我们血清最终浓度也不止30%。但是操作时不是这样直接加在一起的，我们是先配好冻存液（培养基：血清：DMSO=20%：60%：20%），放4℃。再处理细胞，胰酶消化，离心，再用培养基悬浮，最后细胞悬液和冻存液以1:1比例加在一起，加冻存液时慢点，加一滴混匀再加。冻存时需要使用冻存盒（装异丙醇），放于-80过夜再放于液氮罐，如果没有冻存盒那就自己程度降温吧，从4— -20— -80—液氮罐，各步时间再自己查查吧。$ b. T& ~8 |$ B: d

" k  V4 |. y) u" _! W; a希望可以帮到你。7 d& H4 s' h# o4 q2 S

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haiq1984

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好详细，谢谢了

xiaolong

一般都是十的六次方之上，七次方之下

dianying

回复 haiq1984 的帖子! X7 a. j4 {% I( Q5 x

  r2 u4 a$ s% l& [$ ?* L, L) ~  a如果你的细胞健康的话，4x10的5次方/ml 就足够。

lazyworm

我们2ml的冻存管一般是2*10的7，复苏活率大多在90以上，当然影响活率的还有很多因素。但是我挺想知道冻存液与细胞密度之间的关系。它们究竟关系密切还是在某个细胞密度范围内就可以呢。