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楼主: haiq1984
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细胞冻存时浓度多少合适?   [复制链接]

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发表于 2011-11-10 13:14 |只看该作者
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至少不低于10^5cell/ml,浓度在10^6~10^7之间,同时冻存时的状态很重要,注意冻存和复苏条件!
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发表于 2011-11-10 14:46 |只看该作者
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2 j* j& U3 l" K. E
我也是做人脐带间充质的,冻存的时候是1*10的7/毫升,用的2毫升冻存管,复苏的时候比例80%左右吧,先生是怎么做的?冻存液浓度是多少?复苏温度是40吗?
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发表于 2011-11-11 10:49 |只看该作者
个人认为间充质细胞冻存应该与细胞代数有关,早期的细胞贴壁能力和增殖能力都比较强,细胞少一点,复苏时存活率应该比较高,在较晚期的间充质,增殖贴壁能力下降,细胞数应该多一点较好。我们一般在较早期的细胞1~2×10的6次方,稍晚期的就要4~5左右了,这个楼主可以自己摸索一下,只要复苏后存活率可,细胞数不是最重要的。
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发表于 2011-11-12 15:50 |只看该作者
105~ 106  cells/ml

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发表于 2011-11-12 15:51 |只看该作者
打错了,是5*10^5~5*10^6之间
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发表于 2011-11-12 18:45 |只看该作者
你们还计数?我都没计数耶,我一般是把T25的长满的细胞分两管冻存,然后复苏的时候每管分2瓶复苏,效果挺好!主要看你的冻存手法跟技术了。
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发表于 2011-11-12 19:35 |只看该作者
回复 haiq1984 的帖子
. a+ E& w* N4 E9 o8 \) |
* t9 O9 {8 w# h2 N没事的,只要复苏的时候快速的晃动,保证在一分钟之内复苏完毕就可以了,这个浓度只是有点太浪费冻存液了
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发表于 2011-11-12 22:02 |只看该作者
冻的细胞数量少可以少加点冻存液,比如冻0.5ml。细胞密度一般每毫升10的6到10的7之间
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发表于 2011-11-12 22:39 |只看该作者
回复 yangwy028 的帖子
4 i: D5 l4 Z5 t  Q3 }5 k
( G$ i5 U% F2 Y哈哈,这个不怕,我的细胞还是有点珍贵的!呵呵

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发表于 2011-11-12 22:40 |只看该作者
回复 zhusealin 的帖子. s- [8 z! p3 K* M( S* @0 x$ _( x

" q& d' q4 T5 S. G2 k$ _1 L. @$ S; r恩,谢谢!这个主意好!
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