慢病毒包病毒293ft总是飘，收病毒前细胞融合成一个一个球，是怎么回事

xiaojunhu1985

慢病毒包病毒12-16小时换液时，293ft有点飘，收病毒前细胞融合成一个一个球，是怎么回事

sunny2829

应该是你293FT种太密了，不妨稀点。还有，种293FT之前，dish 有没有明胶包被啊？明胶包被的话，有利于细胞贴壁，就不易漂浮了~~~

rexhz

细胞状态不行，

xiaojunhu1985

已经包过明教。细胞数目的确会影响。会不会是支原体污染啊

sunny2829

回复 xiaojunhu1985 的帖子' N, A" a0 O( a  I1 h; z8 J4 c

0 Z7 i# x; g4 M那你不妨测一下支原体~~~PCR法，然后跑个胶。4 v9 v  O+ c: g* Y; k- k
包装病毒的话，包装细胞还是挺重要的，你还是先了解细胞的具体状况~~~

beyond2008

换液的时候，把培养基温一下。不要太凉。。。。

刘森泉

细胞密度70-80%较好，板用明胶包被，293细胞状态要好，最好处于增殖期，还有动作要轻，因为病毒感染后真的很容易浮起来，所以我们实验室就不换液了，质粒加进去6小时后换一次液，之后就等待收病毒了。

huangcong1988

12~16h换液？什么意思呢？您12~16h就收集病毒上清了？那样滴度会高么？

xiaojunhu1985

是换液，收集病毒48-72小时

sj03572001

这种情况是正常的，你的包装体中其中有个VSVG的质粒对吧，VSVG是种糖蛋白，能引起293细胞发生细胞融合，导致细胞出现形态变大，多核，但不影响出毒，不过还是建议VSVG的质粒的量要减低点