原代肿瘤细胞提取肿瘤干细胞培养的问题

shandazlj

请教：我研究的是小儿肾母细胞瘤，我想从取的原代肿瘤细胞中分选肿瘤干细胞（sp分选）。请问需要取到原代后直接上机分选吗？如果时间不允许，我想先培养一段时间再分选的话，需要用无血清培养基吗？是不是加入血清的话肿瘤干细胞就会分化啊？新手上路，多谢指点！

evial

最好不要培养，环境变了就不能代表体内情况，取下后24小时内做掉。消化一下封闭染色需要一天时间。你还不知道怎么分选就像做这个研究？

doctor009

我做的多发性骨髓瘤干细胞，我们的做法是取骨髓后直接分离，培养！不能培养后再去分离，

shandazlj

回复 doctor009 的帖子! I$ q5 m& U' j+ b: y2 a! L
7 |4 _4 f$ O- J" k6 c% q
多谢指点！

shandazlj

回复 evial 的帖子
' ?5 D/ q" ?4 s. g
+ \" T# s) S$ R- x0 ~$ i- y因为没有找到合适的marker，打算用sp分选来着。谢谢指点！

shandazlj

回复 doctor009 的帖子0 G. E  a0 Y: ^  z; H
' Z: u# O$ u7 {7 l1 ^/ r* H1 m
另外，弱弱的问一句，我看好多文献报道从细胞系分选肿瘤干细胞之前都是先在加血清的培养基里培养的。分选前血清对细胞系肿瘤干细胞的影响不大吗？会不会降低比例啊？

doctor009

细胞系与原代细胞不一样！

淡定

无血清培养基做体外培养能似乎不能满足肿瘤的营养需求，毕竟体外培养不能代替体内的环境。